[發明專利]一種溫州病毒的檢測引物及應用

在審

• 申請號: 201710199477.0
• 申請日: 2017-03-30
• 公開（公告）號: CN107419033A
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 尹飛飛;張優;呂剛;朱奇軒;王珊珊;吳悅;崔秀吉;李麗華;梁培
• 申請（專利權）人: 海南醫學院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 李雙艷

技術領域

本發明涉及醫學檢驗領域，具體而言，涉及一種溫州病毒的檢測引物及應用。

背景技術

溫州病毒，屬于沙粒病毒科沙粒病毒屬，是一種由包膜的單鏈線狀RNA病毒病毒基因組包含有兩個區域：S段編碼核殼蛋白(NP)和包膜糖蛋白(GP)，L段編碼病毒RNA依賴性RNA聚合酶(RdRP)和鋅結合蛋白(ZP)。沙粒病毒是重要的人畜共患病原體，與中樞神經系統疾病和出血熱相關。

溫州病毒于2014年首次在浙江省家鼠的體內檢測出來，是一種新的沙粒病毒。目前，尚未建立針對溫州病毒的有效檢測方法。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種溫州病毒的檢測引物，該檢測引物能特異的檢測出溫州病毒。

本發明的第二目的在于提供上述檢測引物在溫州病毒檢測中的應用。

本發明的第三目的在于提供上述檢測引物在制備檢測溫州病毒試劑盒中的應用。

本發明的第四目的在于提供一種溫州病毒的檢測試劑盒，該檢測試劑盒能方便快捷地檢測出溫州病毒。

本發明的第五目的在于提供上述試劑盒在檢測溫州病毒中的應用。

為了實現本發明的上述目的，采用以下技術方案：

一種溫州病毒的檢測引物，該檢測引物包括引物對，引物對的堿基序列分別如SEQ ID No.1-2所示。

上述的溫州病毒的檢測引物在溫州病毒檢測中的應用。

上述溫州病毒的檢測引物在制備檢測溫州病毒試劑盒中的應用。

一種溫州病毒的檢測試劑盒，該檢測試劑盒包括上述的檢測引物。

上述檢測試劑盒在檢測溫州病毒中的應用。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：本發明提供的溫州病毒檢測引物能準確地、特異地檢測出溫州病毒，濃度低至1×10¹拷貝/μL依然能檢測出，具有較高的靈敏度；應用該檢測引物檢測溫州病毒能提高檢測的準確性，且應用該檢測引物制備檢測溫州病毒的試劑盒可以方便應用，檢測快速靈活。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應當理解，以下附圖僅示出了本發明的某些實施例，因此不應被看作是對范圍的限定，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他相關的附圖。

圖1為本發明實施例1提供的電泳結果圖；

圖2為本發明實施例4提供的酶切結果電泳圖；

圖3為本發明實驗例1提供的標準曲線圖；

圖4為本發明實驗例1提供的熔解曲線圖；

圖5為本發明實驗例2提供的1號樣本檢測結果圖；

圖6為本發明實施例2提供的1號樣本熔解曲線圖；

圖7為本發明實驗例2提供的2號樣本檢測結果圖；

圖8為本發明實施例2提供的2號樣本熔解曲線圖。

具體實施方式

下面將結合實施例對本發明的實施方案進行詳細描述，但是本領域技術人員將會理解，下列實施例僅用于說明本發明，而不應視為限制本發明的范圍。實施例中未注明具體條件者，按照常規條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規產品。

Random Primers(Invitrogen)由海南雋譽有限公司合成，Ribolock RNasin(Thermo Fisher)購自海南雋譽有限公司，MLV RT(Promega)購自海南雋譽有限公司，dNTPs(凱基)購自海南萊博科達科技有限公司，SuperReal PreMix Plus實時熒光定量試劑盒(TIANGEN)購自海南萊博科達科技有限公司，瓊脂糖凝膠回收試劑盒(Omega)購自海南萊博科達科技有限公司，病毒RNA提取試劑盒(Qiagen)購自海南雋譽有限公司。其余出常規試劑均購自國藥集團。

下面對本發明實施例的一種溫州病毒檢測引物及應用進行具體說明。

溫州病毒，屬于沙粒病毒科沙粒病毒屬，是一種有包膜，單鏈線狀RNA病毒。溫州病毒于2014年首次在浙江省家鼠的體內檢測出來，是一種新的沙粒病毒。在自然界感染單一的或一定種類的嚙齒動物，造成持續性感染。動物不發病，也不產生抗體，但長期排毒。人是偶發的宿主，常因接觸受染動物而感染。

由于溫州病毒是一種新的沙粒病毒，目前對溫州病毒的檢驗檢疫手段較為簡單；沒有專門針對溫州病毒的分子檢測手段。因此需要開發針對溫州病毒的分子檢測手段。

一種溫州病毒的檢測引物，該檢測引物包括引物對，引物對的堿基序列分別如SEQ ID No.1-2所示。