[發(fā)明專利]一種靶向腫瘤細(xì)胞的多肽及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710197374.0
• 申請(qǐng)日: 2017-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN107022004B
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭麗端;童強(qiáng)松;宋華杰;方二虎;王曉靜;葉霖;李聃;楊楓
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院
• 主分類號(hào): C07K14/00
• 分類號(hào): C07K14/00;C12Q1/02
• 代理公司: 北京輕創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212
• 代理人: 陳衛(wèi)

本發(fā)明涉及一種靶向腫瘤細(xì)胞的多肽及其應(yīng)用，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；還涉及一種促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和/或遷移的多肽及其應(yīng)用。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，本發(fā)明的多肽的穿膜結(jié)構(gòu)域本身沒(méi)有細(xì)胞毒性，但連接腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)構(gòu)域后，有明顯的改變腫瘤增殖、遷移侵襲行為的效應(yīng)。本發(fā)明的多肽可成為篩選靶向性生物治療腫瘤的活性多肽。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及腫瘤靶向治療領(lǐng)域，更特別地，涉及一種靶向腫瘤細(xì)的多肽及其應(yīng)用，還涉及一種促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和/或遷移的多肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類生命的重大疾病，已成為人類死亡的主要原因。隨著醫(yī)療技術(shù)和基礎(chǔ)研究的進(jìn)步，多種腫瘤的治療已經(jīng)取得了明顯的改善，但常規(guī)腫瘤治療方法(包括手術(shù)、化療、放療及免疫療法)給機(jī)體正常組織帶來(lái)?yè)p傷，造成很大的副作用，給腫瘤患者帶來(lái)極大的痛苦。

腫瘤靶向治療是指通過(guò)干擾調(diào)控腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵靶標(biāo)，針對(duì)性地治療腫瘤。與傳統(tǒng)放化療方法比較，腫瘤靶向療法能減少對(duì)正常組織的損害，降低治療的副反應(yīng)，減輕患者痛苦。蛋白質(zhì)作為生物學(xué)功能的執(zhí)行者，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。近年來(lái)，研究者發(fā)現(xiàn)具有生物學(xué)活性的短肽可能成為腫瘤靶向治療的有力工具之一。

生物活性多肽的研究始于內(nèi)源性分泌肽和神經(jīng)肽的發(fā)現(xiàn)。除分泌性短肽和神經(jīng)肽之外，機(jī)體內(nèi)是否還存在未知的其他短肽序列一直困擾著研究者。隨著RNA深度測(cè)序及核糖體圖譜技術(shù)的發(fā)展，研究人員發(fā)現(xiàn)數(shù)以萬(wàn)計(jì)了的小開放閱讀框(sORF)，其中部分編碼產(chǎn)物已經(jīng)被證實(shí)。

細(xì)胞穿膜肽(cell penetrating peptides,CPPs)是一類具有很強(qiáng)穿透細(xì)胞膜能力的短肽，帶有正電荷，可以直接穿透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞漿和細(xì)胞核，可作為藥物載體進(jìn)行腫瘤治療。

因此，需要構(gòu)建一種既能靶向腫瘤細(xì)胞，又能高效入胞的新型多肽。

發(fā)明內(nèi)容

肝細(xì)胞核因子4A(HNF4A)在多種腫瘤中發(fā)揮重要的生物學(xué)作用。發(fā)明人通過(guò)RNA-seq分析，發(fā)現(xiàn)其上游序列存在多個(gè)sORF，通過(guò)構(gòu)建sORF表達(dá)載體，發(fā)現(xiàn)sORF編碼產(chǎn)物能明顯調(diào)控腫瘤細(xì)胞內(nèi)HNF4A表達(dá)水平，且影響多種腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性。為進(jìn)一步明確sORF編碼產(chǎn)物對(duì)腫瘤發(fā)生、發(fā)展的調(diào)控作用，發(fā)現(xiàn)靶向活性治療肽，人工合成了基于內(nèi)源性sORF編碼序列的活性肽。

基于該研究，本發(fā)明提供了一種靶向腫瘤細(xì)胞的多肽，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

本發(fā)明還提供了上述靶向腫瘤細(xì)胞的多肽在抗腫瘤藥物研究中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和/或遷移的多肽，其包括腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)構(gòu)域和穿膜結(jié)構(gòu)域，所述腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

優(yōu)選地，所述穿膜結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

優(yōu)選地，所述穿膜結(jié)構(gòu)域連接于所述腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)構(gòu)域的N端。

本發(fā)明還提供了上述促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和/或遷移的多肽在抗腫瘤藥物研究中的應(yīng)用。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于，本發(fā)明的多肽的穿膜結(jié)構(gòu)域本身沒(méi)有細(xì)胞毒性，但連接腫瘤細(xì)胞靶向結(jié)構(gòu)域后，有明顯的改變腫瘤增殖、遷移侵襲行為的效應(yīng)。本發(fā)明的多肽可成為篩選靶向性生物治療腫瘤的活性多肽。

附圖說(shuō)明

圖1為用本發(fā)明的多肽和對(duì)照多肽孵育腫瘤細(xì)胞后的熒光顯微鏡照片；

圖2為不同濃度的多肽對(duì)SK-N-SH細(xì)胞增殖活性影響的統(tǒng)計(jì)圖；

圖3為不同濃度的多肽對(duì)PC-3細(xì)胞增殖活性影響的統(tǒng)計(jì)圖；

圖4為含有不同濃度多肽的軟瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)SK-N-SH細(xì)胞10-14天后的培養(yǎng)孔的四甲基偶氮唑藍(lán)染色照片；