[發明專利]一種運用分子信標-熔解曲線技術鑒定細菌的試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201710186201.9
• 申請日: 2017-03-27
• 公開（公告）號: CN106834520B
• 公開（公告）日: 2020-12-18
• 發明（設計）人: 任緒義;呂江峰;周靜
• 申請（專利權）人: 杭州迪安生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6816
• 分類號: C12Q1/6816;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

1.運用分子信標-熔解曲線技術鑒定細菌的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括如下四種分子信標探針混合液和2×雜交反應液；

所述分子信標探針的核苷序列如SEQ ID NO：1~4所示，其中，SEQ ID NO：1的5′端標記熒光報告基團FAM，3′端標記熒光淬滅基團DABCYL；

SEQ ID NO：2的5′端標記熒光報告基團FAM，3′端標記熒光淬滅基團DABCYL；

SEQ ID NO：3的5′端標記熒光報告基團HEX，3′端標記熒光淬滅基團DABCYL；

SEQ ID NO：4的5′端標記熒光報告基團CY5，3′端標記熒光淬滅基團DABCYL；

所述2×雜交反應液包括如下組分：

甜菜堿 0.25~0.5M、DMSO 1~2%(V/V)、Tris-HCl 50~100mM、氯化鉀 100~500mM、氯化鎂50~100mM；

所述四種分子信標探針混合液中，各分子信標探針的濃度如下：

分子信標探針v6p1濃度為0.5~1.0OD，分子信標探針v6p2濃度為0.5~1.0OD，分子信標探針v1p1濃度為0.25~0.5OD，分子信標探針v1r濃度為0.25~0.5 OD。

2.根據權利要求1所述的運用分子信標-熔解曲線技術鑒定細菌的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括陽性對照和空白對照。

3.根據權利要求2所述的運用分子信標-熔解曲線技術鑒定細菌的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照為大腸桿菌CICC10421=078:K80菌株中純化得的核酸，所述空白對照為水。