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[發(fā)明專利]百子蓮SK3型脫水素蛋白及其編碼基因和探針有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201710184546.0 申請日: 2017-03-24
公開(公告)號: CN106967724B 公開(公告)日: 2019-10-08
發(fā)明(設(shè)計)人: 楊舟;張荻;申曉輝 申請(專利權(quán))人: 上海交通大學(xué)
主分類號: C12N15/29 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;A01H5/00;C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 上海漢聲知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236 代理人: 郭國中
地址: 200240 *** 國省代碼: 上海;31
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 百子蓮 sk3 脫水 蛋白 及其 編碼 基因 探針
【說明書】:

發(fā)明涉及一種百子蓮(Agapanthus praecox)SK3型脫水素蛋白及其編碼基因和探針,所述蛋白包括如下(a)或(b)的蛋白質(zhì):(a)由如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì);(b)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列經(jīng)過取代、缺失或者添加一個或幾個氨基酸且具有百子蓮SK3型脫水素蛋白活性的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。本發(fā)明還提供了一種編碼上述蛋白質(zhì)的核酸序列,以及檢測上述核酸序列的探針。本發(fā)明為改善百子蓮和各類觀賞花卉的抗逆能力提供了依據(jù);為觀賞植物分子輔助育種及種質(zhì)資源保存奠定了理論基礎(chǔ),具有很大的應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及百子蓮逆境脅迫響應(yīng)過程中的一種重要保護(hù)蛋白SK3型脫水素蛋白其編碼基因和探針,具體涉及一種百子蓮SK3型脫水素蛋白及其編碼基因和探針。

背景技術(shù)

脫水素(Dehydrin)屬于細(xì)胞胚胎發(fā)育晚期豐度蛋白第二族(LEAII),能夠在植物胚胎發(fā)育后期以及處于干旱、低溫、鹽堿等逆境的植株中大量表達(dá)并發(fā)揮重要作用,有著高親水性、無序性和抗氧化性的特點(diǎn)。大量植物會在胚胎發(fā)育形成的過程中和應(yīng)激反應(yīng)下積累脫水素,以應(yīng)對如干旱、高溫嚴(yán)寒和高鹽等非生物脅迫環(huán)境。許多研究證實(shí),在非生物脅迫下,植物脫水素的表達(dá)與積累和植物抗逆性之間存在著正相關(guān)關(guān)系。

百子蓮(Agapanthus praecox),單子葉多年生草本花卉,原產(chǎn)于非洲南部,別名藍(lán)百合、非洲百合。其植株挺拔,葉形秀美,花量大、花期長、觀賞價值高。是備受人們的喜愛的常用園林花卉,多用于庭院栽培和切花生產(chǎn),在歐美地區(qū)有著“愛情花”的美譽(yù)。

近年來在對植物抗逆生理的分子研究中,已在小麥、大麥、水稻、玉米、大豆、棉花、枇杷、梨樹、橡樹等多種作物和果樹中分離與克隆出脫水素基因。但對于觀賞植物尤其是球根花卉中脫水素的克隆、表達(dá)模式及蛋白序列尚不清楚。目前,未有任何與百子蓮脫水素蛋白結(jié)構(gòu)及其編碼基因序列相關(guān)的文獻(xiàn)報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的缺陷,本發(fā)明目的在于填補(bǔ)百子蓮SK3脫水素基因的克隆、表達(dá)模式分析以及百子蓮SK3型脫水素蛋白的空白,提供了一種百子蓮SK3型脫水素蛋白及其編碼基因和探針。本發(fā)明公開了百子蓮SK3基因轉(zhuǎn)化擬南芥后的生理效應(yīng)及表達(dá)模式,為今后利用基因工程技術(shù)對SK3基因表達(dá)的時空特性進(jìn)行調(diào)控,為改善百子蓮和各類觀賞花卉的抗逆能力提供了依據(jù),從而為提高觀賞花卉的抗逆能力和分子育種工作提供了理論依據(jù),具有很大的應(yīng)用價值。

在本實(shí)驗(yàn)的前期研究中,進(jìn)行了百子蓮胚性細(xì)胞超低溫保存實(shí)驗(yàn),并通過轉(zhuǎn)錄組學(xué)與蛋白組學(xué)的比較分析數(shù)據(jù),篩選到SK3型脫水素蛋白在轉(zhuǎn)錄與蛋白層面對超低溫復(fù)合逆境均具有積極的響應(yīng)。因此推斷對保護(hù)植物在復(fù)合上逆境中的細(xì)胞活性具有重要的調(diào)控作用。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:

第一方面,本發(fā)明提供一種百子蓮SK3型脫水素蛋白,包括如下(a)或(b)的蛋白質(zhì):

(a)由如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì);

(b)SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列經(jīng)過取代、缺失或者添加一個或幾個氨基酸且具有百子蓮SK3型脫水素蛋白活性的由(a)衍生的蛋白質(zhì)。

優(yōu)選的,所述蛋白質(zhì)為SEQ ID NO.4所示氨基酸序列經(jīng)過1~50個氨基酸的缺失、插入和/或取代,或者在C末端和/或N末端添加1~20個以內(nèi)氨基酸而得到的序列。

進(jìn)一步優(yōu)選的,所述蛋白質(zhì)為SEQ ID NO.4所示氨基酸序列中1~10個氨基酸被性質(zhì)相似或相近的氨基酸所替換而形成的序列。

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