[發明專利]一種檢測EGFR基因突變的方法及試劑盒

在審

• 申請號: 201710172663.5
• 申請日: 2017-03-21
• 公開（公告）號: CN106929582A
• 公開（公告）日: 2017-07-07
• 發明（設計）人: 郎秋蕾;周小川;李璐璐;方超;梁洪;林彬;張瑞靜
• 申請（專利權）人: 杭州聯川基因診斷技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種檢測EGFR基因突變的試劑盒，其特征在于，包含通用引物和特異性引物。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的通用引物序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的特異性引物包括：

用于擴增EGFR基因的外顯子18的區域的特異性引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

用于擴增EGFR基因的外顯子19的區域的特異性引物序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示；

用于擴增EGFR基因的外顯子20的區域的特異性引物序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；

用于擴增EGFR基因的外顯子21的區域的特異性引物序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的特異性引物可以被硫代修飾、2-氟代核糖核酸修飾、2'-O-甲基核糖核酸修飾、5-甲基脫氧胞嘧啶修飾、脫氧次黃嘌呤修飾、2-氨基嘌呤修飾、5-溴-脫氧尿嘧啶修飾、反向dT修飾、雙脫氧胞苷修飾、間臂修飾、氨基修飾、巰基修飾、磷酸化修飾、生物素修飾、鎖核苷酸修飾中的任意一種方式修飾，也可以是多種方式同時修飾。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR混合反應液、純化磁珠和陽性對照。

6.一種非診斷目的的利用如權利要求1-5任一項所述的試劑盒檢測EGFR基因突變的方法，其特征在于，包括以下步驟：特異性引物與目標模板DNA序列結合、通用引物擴增待測樣本目標區域，磁珠純化文庫，對得到的文庫進行高通量測序并分析EGFR基因的突變。