[發(fā)明專利]一種DNA分子STTM?miR482a及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710172193.2 | 申請日： | 2017-03-22 |
| 公開（公告）號： | CN106754932A | 公開（公告）日： | 2017-05-31 |
| 發(fā)明（設計）人： | 欒雨時;楊廣磊;崔軍;姜寧;肖裕 | 申請（專利權）人： | 大連理工大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00 |
| 代理公司： | 大連格智知識產權代理有限公司21238 | 代理人： | 劉琦 |
| 地址： | 116024 遼寧省*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 dna 分子 sttm mir482a 及其 應用 | ||
1.一種DNA分子STTM-miR482a，其特征在于：所述DNA分子的核苷酸序列為SEQ ID NO.1所示。
2.權利要求1所述DNA分子STTM-miR482a的應用，其特征在于，將表達DNA分子STTM-miR482a的重組表達載體用于調控植物中microRNA482a表達、調控植物抗病性。
3.根據(jù)權利要求2所述DNA分子STTM-miR482a的應用，其特征在于，所述調控的具體方法為：
將所述表達DNA分子STTM-miR482a的重組表達載體轉化農桿菌GV3101并涂布在含有卡那霉素、鏈霉素及利福平的YEB固體培養(yǎng)基上，挑取單菌落進行菌液PCR驗證；
選取陽性工程菌侵染預培養(yǎng)后的番茄子葉，共培養(yǎng)，分化出芽；
將抗性芽移至生根培養(yǎng)基中誘導生根后移栽，實時定量PCR驗證即得到可調控microRNA482a表達、調控植物抗病性的轉基因植物。
4.根據(jù)權利要求3所述DNA分子STTM-miR482a的應用，其特征在于，所述目的植物為雙子葉植物番茄。
5.根據(jù)權利要求2所述DNA分子STTM-miR482a的應用，其特征在于，所述重組表達載體為含有DNA分子STTM-miR482a的表達載體。
6.根據(jù)權利要求5所述DNA分子STTM-miR482a的應用，其特征在于，以PBI121載體為表達載體制備表達STTM-miR482a的重組表達載體；
具體制備方法為：將所述DNA分子STTM-miR482a插入PBI121載體的Sac Ⅰ和Bam H Ⅰ之間，且插入的位置為CaMV35s啟動子之后，即得到表達STTM-miR482a的重組載體。
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