[發明專利]熱休克蛋白gp96在治療重癥肌無力癥中的應用

在審

• 申請號: 201710157300.4
• 申請日: 2017-03-16
• 公開（公告）號: CN106983855A
• 公開（公告）日: 2017-07-28
• 發明（設計）人: 孟頌東;李鑫;鞠瑩
• 申請（專利權）人: 北京熱休生物技術有限公司
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;A61K38/17;A61P21/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及生物醫藥領域，具體地說，涉及熱休克蛋白gp96在治療重癥肌無力癥中的應用。

背景技術

重癥肌無力(myasthenia gravis，MG)是一種主要累及神經肌肉接頭突觸后膜上乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor，AchR)的自身免疫性疾病。臨床主要表現為部分或全身骨骼肌無力和易疲勞，活動后癥狀加重，經休息和膽堿酯酶抑制劑(cholinesterase inhibitors，ChEI)治療后癥狀減輕。患病率為77～150/100萬，年發病率為4～11/100萬。女性患病率大于男性，約3:2，各年齡段均有發病，兒童1～5歲居多。重癥肌無力的發病原因分兩大類，一類是先天遺傳性，極少見，與自身免疫無關；第二類是自身免疫性疾病，最常見。發病原因尚不明確，普遍認為與感染、藥物、環境因素有關。同時重癥肌無力患者中有65％～80％有胸腺增生，10％～20％伴發胸腺瘤。

熱休克蛋白(Heat shock protein，HSP)是一類在生物進化中高度保守且廣泛存在于原核及真核生物中的蛋白質。HSP根據同源程度和分子量大小可分為HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、HSP40、小分子HSP和泛素等多個亞家族。熱休克蛋白(Heat shock protein，HSP)gp96屬于HSP90亞家族的成員，該蛋白是細胞內質網上含量最豐富的熱休克蛋白。目前未有報道熱休克蛋白gp96在治療重癥肌無力癥中的應用。

發明內容

為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供熱休克蛋白gp96在治療重癥肌無力癥中的新應用。

為了實現本發明目的，本發明的技術方案如下：

本發明首先提供了熱休克蛋白gp96在制備治療重癥肌無力癥的產品中的應用，所述熱休克蛋白gp96為a1)或a2)或a3)：

a1)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白質；

a2)在a1)的N端或/和C端連接標簽得到的融合蛋白質；

a3)將a1)的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白質。

進一步地，所述熱休克蛋白gp96的獲得方式為1)或2)或3)：

1)細胞和組織中天然純化；

2)利用酵母菌表達重組蛋白；

3)利用昆蟲細胞表達重組蛋白。

更進一步地，所述產品的功能為如下A1)、A2)和A3)中的至少一種：

A1)誘導調節性T細胞的產生；

A2)降低乙酰膽堿受體AchR抗體滴度；

A3)降低重癥肌無力癥臨床評分。

其中，所述調節性T細胞為CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺調節性T細胞。

作為優選，所述產品為注射劑。

本發明還提供了熱休克蛋白gp96的編碼基因在制備治療重癥肌無力癥的產品中的應用，所述編碼基因為d1)或d2)或d3)：

d1)核苷酸序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；

d2)與d1)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且編碼所述熱休克蛋白gp96的DNA分子；

d3)在嚴格條件下與d1)限定的核苷酸序列雜交，且編碼所述熱休克蛋白gp96的DNA分子。

所述嚴格條件為在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下雜交，并用該溶液洗膜。

本發明還提供了含有熱休克蛋白GP96編碼基因的生物材料，所述生物材料為載體、宿主細胞、轉基因細胞系、工程菌、昆蟲或酵母。

進一步地，上述生物材料在制備治療自身免疫性溶血性貧血藥物中的應用也屬于本發明的保護范圍。

本發明進一步提供一種治療重癥肌無力癥的產品，其活性成分為熱休克蛋白gp96，所述熱休克蛋白gp96為a1)或a2)或a3)：

a1)氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白質；

a2)在a1)的N端或/和C端連接標簽得到的融合蛋白質；

a3)將a1)的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白質。

所述產品的功能為如下A1)、A2)和A3)中的至少一種：

A1)誘導調節性T細胞的產生；

A2)降低乙酰膽堿受體AchR抗體滴度；