[發明專利]白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用

有效

• 申請號: 201710154656.2
• 申請日: 2017-03-15
• 公開（公告）號: CN106868018B
• 公開（公告）日: 2019-09-24
• 發明（設計）人: 李慧玉;寧坤;董京祥;姜靜;黃海嬌;陳肅
• 申請（專利權）人: 東北林業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/00
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 侯靜

白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用，它涉及一種白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用。其目的是提供一種白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用。白樺BpSPL9基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示；氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。該基因可以增強植物的抗逆境脅迫能力。利用根瘤農桿菌介導的葉盤轉化法，進行白樺的遺傳轉化，并對獲得的轉基因白樺株系進行了耐鹽性和抗旱性分析，結果顯示，白樺BpSPL9基因能夠提高白樺的抗鹽、耐旱能力。通過本發明可培育出抗鹽、抗旱的轉BpSPL9基因的白樺新品種，本發明應用于林木分子育種領域。

技術領域

本發明涉及白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用。

背景技術

轉錄因子(transcription factor，TF)也稱反式作用因子，是指那些具有同真核基因啟動子區域中順式作用元件發生特異性結合，或是結合已知DNA結合域結構特征的蛋白質分子，具有激活或抑制基因轉錄效應的功能。高等植物中的轉錄因子數量大、種類多且轉錄調控較為復雜，轉錄因子的研究日益受到人們的廣泛關注。目前相繼從高等植物中分離出了大量調控干旱、高鹽、低溫、激素、病原反應及生長發育等相關的轉錄因子。

典型的植物轉錄因子一般包含有4個功能區，即DNA結合域(DNA-bindingdomain)、轉錄調控域(transcription regulation domain)包括激活和抑制域、寡聚化位點(oligomerization site)以及核定位信號(nuclear localization signal)。但不同的轉錄因子可能缺少某一功能區，如特異的DNA結合域或轉錄調控域，轉錄因子通過這些功能區域，在特定的時間進入細胞核內與啟動子順式作用元件或與其他轉錄因子的功能區域相互作用來調控基因的轉錄表達。

近年來生物技術的發展以及分子育種研究的興起，為利用基因工程手段改良林木、加速林木新品種的選育奠定基礎。白樺是我國東北與內蒙古地區重要的造林樹種，是優良的短周期闊用材樹種，傳統的育種手段難以在短期內實現林木性狀改良的需求，通過轉基因手段對其進行遺傳改良具有很大意義。

發明內容

本發明提供一種白樺基因及其編碼蛋白和應用。

本發明白樺BpSPL9基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO：1所示。

本發明編碼白樺BpSPL9基因的蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO：2所示。

本發明白樺BpSPL9基因的應用是指在增強植物的抗逆境脅迫能力上的應用。

本發明公開了白樺BpSPL9基因及其編碼蛋白和應用，本發明構建一種含有BpSPL9基因的植物表達載體，該載體使用了花椰菜花葉病毒(CaMV35S)啟動子，并加入了選擇性標記卡那霉素。利用根瘤農桿菌介導的葉盤轉化法，進行白樺的遺傳轉化，并對獲得的轉基因白樺株系進行了耐鹽性和抗旱性分析，結果顯示，轉基因株系在受到1.0％NaCl和15％PEG脅迫12h、24h后，這兩種酶的活性均明顯高于非轉基因對照，表明白樺BpSPL9基因能夠正向調控植物體內的SOD活性和POD活性，從而增強植物的抗逆境脅迫能力，測定的H₂O₂含量中，脅迫處理12h、24h后測定的轉基因株系中H₂O₂含量比非轉基因株系H₂O₂含量減少，說明白樺BpSPL9基因能夠提高白樺的抗鹽、耐旱能力。

附圖說明

圖1為BpSPL9基因PCR擴增產物電泳圖譜；

圖2為BpSPL9基因TOPO反應后菌液PCR檢測電泳圖譜；

圖3為BpSPL9基因LR反應后菌液PCR檢測電泳圖譜；

圖4為BpSPL9基因電擊轉化農桿菌后菌液PCR檢測電泳圖譜；