[發(fā)明專利]從黃芩根中提取黃芩多糖的分離純化方法

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• 申請日: 2017-03-09
• 公開（公告）號: CN106977614A
• 公開（公告）日: 2017-07-25
• 發(fā)明（設計）人: 崔新愛;周軍輝;劉國宇;毛祝新;石新衛(wèi);路強強
• 申請（專利權）人: 陜西省西安植物園
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 西安文盛專利代理有限公司61100
• 代理人: 佘文英

技術領域

本發(fā)明涉及一種從中藥粉黃芩中分離制備其有效成黃芩多糖的生產工藝。

背景技術

黃芩(Scutellaria baikalensis Georgi)是我國傳統(tǒng)中藥重要組成之一，其根部作為一種傳統(tǒng)中藥材主要用于抗病毒感染細菌感染、抗腫瘤、清除自由基、調節(jié)免疫等，同時還具有降低膽固醇和血壓的功效。其所含有的多種有效成分逐漸被人們所發(fā)現(xiàn)，其中包括黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、黃芩多糖等。其中，黃芩多糖由于其分離純化手段復雜導致國內外對其關注度不夠，其作為生物活性多糖家族的一份子，具有良好的抗氧化和免疫調節(jié)作用，因此人們逐漸對黃芩多糖藥效以及分離的研究工作產生興趣，期望發(fā)現(xiàn)更多關于黃芩等中藥材的生物醫(yī)學作用。

目前植物多糖的提取方法主要有：熱水浸提法、溶劑提取法、堿浸提法、酸浸提法、酶解提取法、微波提取法、超濾法以及超聲波法等。經過分離沉淀獲得的多糖提取物中，常會混雜著蛋白質、色素、無機鹽以及醇不溶的小分子有機物(如低聚糖)等雜質，需要分別除去。除蛋白質常用的方法有：Sevag法、三氯醋酸法、層析法、酶法、等電點法、三氟三氯乙烷法及硫酸鋅沉淀法等。脫色常用的方法有：金屬絡合物法、離子交換法、氧化法和吸附法，其中金屬絡合物法主要是采用一重金屬銅、鐵、鉛等沉淀多糖，使多糖和部分色素相分離；氧化法主要是用過氧化氫或者濃氨水進行脫色；吸附法主要包括DEAE-纖維素法，活性炭吸附法和硅藻土吸附法等。除去低分子質量的雜質，如低聚糖、脫蛋白殘留溶劑、無機鹽等，常用的方法有透析法、超濾法、凝膠過濾法和離子交換樹脂法等。這些方法或多或少的存在：1.分離過程使用具有明確毒性的溶劑、雜質較多：2.工藝不易放大，不適合工業(yè)化生產，生產周期較長，操作復雜，生產成本較高；3.有毒溶劑不但使成品存在被污染的危險，并且對生產環(huán)境和操作人員構成潛在的危害。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種從黃芩根中提取黃芩多糖的分離純化方法，本發(fā)明所述的黃芩多糖純化方法方便易行、可操作性好、易于工業(yè)化生產，避免了有毒溶劑和復雜設備的使用，可實現(xiàn)黃芩粗多糖的前期快速除雜的目的。

實現(xiàn)本發(fā)明目的所采用的技術方案是：一種從黃芩根中提取黃芩多糖的分離純化方法，該方法包括以下步驟：

(1)脫脂：將黃芩材粉碎成50-100目的粗粉，加入索氏提取器內進行脫脂三次，脫脂完成后自然晾干，得到脫脂后的黃芩粉末；

(2)水提：將脫脂后的黃芩粉末加入索氏提取器內，以水為溶劑對黃芩粉末進行抽提，反復三次，合并抽提液，得到濃度為50-200mg/L的黃芩粗多糖水溶液；

(3)絮凝：向黃芩粗多糖水溶液中緩慢加入20mg/mL的殼聚糖醋酸溶液進行絮凝，時間為10-50分鐘。其中，殼聚糖原料選用生化級別試劑，粘度范圍在50-800mPa·S，水溶液醋酸體積濃度為2％。將絮凝所得沉淀以10000-15000r/min的速度離心分離，回收上清液。

(4)將回收得到的上清液濃縮至原體積的0.25-0.5倍，加入95％乙醇邊加邊攪拌，使最終乙醇含量達到80％。靜置10分鐘后過濾，將沉淀冷凍干燥，得淺黃色黃芩多糖粉末。

本發(fā)明的特點：純化過程可一步將蛋白與色素同時除去，多糖損失率小，操作簡單，成本低，適合工業(yè)化生產，且不使用有毒溶劑，過程安全高效。

具體實施方式

一種從黃芩根中提取黃芩多糖的分離純化方法，按照常規(guī)索氏提取法對50-100目的黃芩粉末進行多糖提取，包括石油醚脫脂，水提三次。選取粘度范圍在50-800mPa·S的生化級別殼聚糖，配置濃度為20mg/mL的殼聚糖醋酸水溶液。將上述殼聚糖溶液加入到黃芩粗多糖的水溶液中，使得殼聚糖在抽提液中的最終濃度為0.2-1mg/mL，緩慢加入進行絮凝，絮凝時間為10-50分鐘，以10000-15000r/min的速度離心分離，回收上清液，濃縮至原體積的0.25-0.5倍，按照常規(guī)水溶醇沉的方法得到多糖沉淀，過濾沉淀，沉淀經冷凍干燥后得黃芩多糖純品。

實施例1