[發明專利]一種利用干細胞構建的人源化乙型肝炎鼠模型及應用

在審

• 申請號: 201710130633.8
• 申請日: 2017-03-07
• 公開（公告）號: CN107080757A
• 公開（公告）日: 2017-08-22
• 發明（設計）人: 李君;李江;孫蘇婉;李蘭娟;夏寧邵;程通;袁倫志
• 申請（專利權）人: 浙江大學;廈門大學
• 主分類號: A61K35/76
• 分類號: A61K35/76;A61K35/28;A61K49/00
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司33212
• 代理人: 唐銀益,李亦慈

1.一種利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法 ，其特征在于，所述的鼠模型由以下步驟獲得：

1）、獲取人干細胞；

2）、將人干細胞植入肝損傷的鼠，致使鼠體內存在移植的人干細胞1×10^4-88；

3）、人肝細胞嵌合：鼠肝臟內，移植的人干細胞分化形成人肝細胞；人源化的免疫系統：鼠體內，移植的人干細胞分化形成人免疫系統；

4）、HBV感染人源化鼠；

5）、HBV感染的確認、肝臟疾病的確認；

所述的干細胞是人骨髓間充質干細胞。

2.根據權利要求1所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法，其特征在于，所述的肝損傷的鼠包括化學藥物所致的肝臟化學損傷和外科手術所致的肝臟物理損傷，所述的鼠是正常小鼠或免疫缺陷小鼠或正常大鼠或免疫缺陷大鼠。

3.根據權利要求1所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法，其特征在于，所述的步驟3）中，移植的人干細胞分化形成人肝細胞，干細胞可表達人肝細胞標志物是HSA，HLA，ALB或NTCP。

4.根據權利要求1所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法，其特征在于，所述的步驟3）中，由移植的人干細胞分化而來的人免疫系統，可檢測到表達人淋巴細胞標志物的CD45⁺/CD4⁺/CD8⁺ T細胞。

5.根據權利要求1或2或3或4所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法，其特征在于，所述的步驟5）中，HBV感染的確認是通過檢測鼠體內持續穩定存在HBV完整顆粒實現，所述的肝臟疾病可以是肝炎、及在該肝炎模型上進展形成肝臟纖維化、肝硬化或肝癌。

6.根據權利要求5所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法，其特征在于，當明確該模型鼠肝臟存在點狀壞死癥狀的為肝炎；當明確該模型鼠肝臟存在炎癥和纖維化，為肝臟纖維化；當出現肝硬化的特征性改變假小葉，為肝硬化；當鼠模型體內存在組織學和影像學可觀察到的原發性肝癌病灶，為肝癌。

7.一種如權利要求1或2或3或4或6所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法所得的鼠模型在闡明慢性乙型肝炎病毒生物學特性的應用。

8.一種如權利要求1或2或3或4或6所述的利用干細胞構建人源化慢性乙型肝炎鼠模型的方法所得的鼠模型在進行慢性乙型肝炎發病機制研究的應用。