[發明專利]用于鑒定黑麂的特異性PCR引物和方法及其在鑒定黑麂中的應用在審
| 申請號: | 201710119277.X | 申請日: | 2017-03-02 |
| 公開(公告)號: | CN106834489A | 公開(公告)日: | 2017-06-13 |
| 發明(設計)人: | 晏鵬;王美菊;李延穎;吳孝兵 | 申請(專利權)人: | 安徽師范大學 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京潤平知識產權代理有限公司11283 | 代理人: | 鄒飛艷,張苗 |
| 地址: | 241002 安徽省蕪*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 鑒定 特異性 pcr 引物 方法 及其 中的 應用 | ||
1.一種用于鑒定黑麂(Muntiacus crinifrons)的特異性PCR引物,其特征在于,所述特異性PCR引物包括如SEQ ID No:1所示的引物1,以及如SEQ ID No:2所示的引物2。
2.一種利用特異性PCR引物鑒定黑麂(Muntiacus crinifrons)的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提取待測樣品的總DNA;
(2)采用特異性PCR引物對所述總DNA進行PCR擴增;
(3)取步驟(2)中得到的產物做瓊脂糖凝膠電泳檢測;
其中,所述特異性PCR引物為權利要求1中所述的特異性PCR引物;
其中,在步驟(3)所得的瓊脂糖凝膠電泳圖中,若含有步驟(2)得到的產物的泳道中出現1條條帶,則判斷所述待測樣品為來自黑麂的樣品,若含有步驟(2)得到的產物的泳道中不出現1條條帶,則判斷所述待測樣品不是來自黑麂的樣品。
3.根據權利要求2所述的方法,其中,出現的1條條帶中所含有的DNA片段的長度為370bp。
4.根據權利要求3所述的方法,其中,以30μL的PCR擴增體系為基準,所述引物的濃度為0.25-0.5pmol/L,DNA模板的用量為45-55ng。
5.根據權利要求2或4中所述的方法,其中,所述PCR擴增過程的退火溫度為55-65℃,退火時間為25-40s。
6.根據權利要求1所述的特異性PCR引物或權利要求2-5中任意一項所述的方法在鑒定黑麂(Muntiacus crinifrons)中的應用。
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