[發明專利]一種流感病毒株及其應用

有效

• 申請號: 201710115724.4
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN107151659B
• 公開（公告）日: 2021-04-02
• 發明（設計）人: 程根宏
• 申請（專利權）人: 蘇州系統醫學研究所
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;A61K39/145;A61P31/16;C07K16/10;C12R1/93
• 代理公司: 石家莊新世紀專利商標事務所有限公司 13100
• 代理人: 張曉龍

本發明涉及一種流感病毒株，其保藏號為CGMCC No.13784。所述流感病毒株在野生型流感病毒株的M2基因編碼區的第78nt后面插入了15nt的序列，如SEQ ID No.2所示。所述流感病毒株的M基因序列，如SEQ ID No.1所示。本發明還涉及上述流感病毒株在制備用于預防和/或治療流感的疫苗中的應用。本發明的目的在于得到一種流感病毒株，并將其應用于疫苗的生產。

技術領域

本發明涉及病毒領域，具體涉及一種流感病毒株及其應用。

背景技術

流感病毒（influenza virus）的基因組由8個單鏈RNA片斷組成，編碼11種蛋白，屬于正粘病毒科流感病毒屬。流感病毒分為A、B、C 三型，A、B 兩型為人群中流行的常見類型，并能引起世界性大流行，但 A 型流感病毒感染范圍更廣，危害更大。流感病毒的8個基因組片斷按分子量由大到小順序依次為PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS基因，這些基因片段編碼的11種病毒蛋白中有8個是病毒結構蛋白（HA、NA、NP、M1、M2、PB1、PB2和 PA）； NS 基因編碼的 NS1和 NS2為兩個非結構蛋白；兩種主要表面糖蛋白：血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）為流感病毒主要表面抗原。根據HA 和NA 的不同，A 型流感病毒又分為不同亞型，目前己鑒定出9種 NA 亞型和16種 HA 亞型。

流感病毒能夠引起嚴重的呼吸道疾病，傳染性很強，容易誘發其他嚴重并發癥。已發生多次世界性大流行，給人類生命健康帶來了極大危害。由于病毒表面蛋白HA和 NA 易發生變異，能夠產生抗原漂移（antigenic drift）和抗原轉換（antigenic shift）兩種突變形式，尤其近年來在世界及中國出現的H1N1和H7N9等流感病毒突變株的爆發和流行在全球一體化背景下給疾病的防控帶來了更多困難，隨著交流越來越頻繁，病毒發生重組或重配的頻率也隨之增加，對于新型突變株的預測也會更加困難，不僅給各國、各地區造成巨大經濟損失，給人們健康和生命安全帶來了極大威脅，更是加大了對疾病的防控難度。

接種疫苗是當前預防流感病毒大流行的最有效手段。現在廣泛使用的流感疫苗設計主要針對病毒的HA和NA蛋白，以HA和NA作為靶抗原誘導機體產生免疫保護，目前已批準應用于人體的滅活病毒疫苗是由對人類危害較大的兩種甲型流感病毒（H1N1和H3N2）和一種乙型流感病毒組成的三價滅活疫苗。雖然針對HA和NA設計的滅活全病毒疫苗安全性較高、抗原組分齊全、免疫原性強，能夠抵抗同亞型流感病毒的攻擊，提供良好的免疫保護。但當前疫苗在流感病毒流行和爆發期間的防治效果并不非常理想，一方面和病毒本身的特點具有重要的關系，同時疫苗設計方法、研發策略和保護效果等也有著直接的影響。首先流感病毒的HA和NA蛋白易發生抗原漂移或轉變，新疫苗的生產要隨著流行毒株的變異而及時更新，病毒疫苗株的選育費時費力，生產周期長、成本高，難以適應防控流感大流行的需要。其次滅活疫苗難以對病毒的感染產生完全充分的免疫保護，無法有效的刺激細胞免疫反應，因此選擇疫苗設計的合適靶抗原、加快候選疫苗株的高效篩選及充分提高疫苗的免疫保護效果是當前流感疫苗研究中非常關鍵和急需解決的問題。

流感病毒疫苗靶抗原選擇中，除了病毒表面HA和NA蛋白外，基質蛋白M也被眾多學者廣泛報道，M蛋白由病毒RNA節段7編碼，含1027個核苷酸，包括非糖基化結構蛋白M1和M2。M1和M2編碼區部分重疊，但具有不同的開放讀碼框架，M1蛋白由252個氨基酸編碼，M2蛋白編碼區包括核苷酸26～51和740～1007，編碼97個氨基酸。M1形成二聚體，結合病毒RNA和囊膜，在病毒核衣殼組裝時發揮作用。M1變異率低、具有型特異性，抗原的差異是病毒分型的依據之一。M2蛋白是流感病毒膜蛋白之一，甲型流感病毒包膜上低密度表達，在感染細胞胞膜上分布廣泛。M2蛋白以同源四聚體形式存在內脂膜上，具有質子泵作用，通過控制質子通道活性調節病毒內的pH 值，影響流感病毒的復制。由于M2 蛋白是除HA、NA外的第三種跨膜蛋白，在人類A 型流感病毒中高度保守。M2蛋白作為具有交叉保護能力的“通用流感疫苗”（universal influenza vaccine）候選靶抗原，已成為目前流感病毒通用疫苗研究的熱點。