[發明專利]用于檢測人類ALDH2基因多態性的引物、探針、試劑盒及方法在審
| 申請號： | 201710115710.2 | 申請日： | 2017-03-01 |
| 公開（公告）號： | CN106947807A | 公開（公告）日： | 2017-07-14 |
| 發明（設計）人： | 鄭仲征;安琳;芮立;尤開 | 申請（專利權）人： | 上海荻碩貝肯醫學檢驗所有限公司;上海荻碩貝肯生物科技有限公司;深圳荻碩貝肯精準醫學有限公司;上海荻碩貝肯生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 201318 上海*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 人類 aldh2 基因 多態性 引物 探針 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于檢測人類ALDH2基因多態性的引物和探針組合，其中引物序列如序列1和2所示，探針序列如序列3和4所示。
2.根據權利要求1所述的引物和探針組合，其中探針的5’端有FAM或VIC修飾，3’端有NFQ-MGB修飾。
3.根據權利要求1或2所述的引物和探針組合，其中每條引物的濃度為300nM，每條探針的濃度為200nM。
4.一種用于檢測人類ALDH2基因多態性的試劑盒，其包含權利要求1-3中任一項所述的引物和探針組合。
5.根據權利要求4所述的試劑盒，其中還包含陽性對照液和空白對照液，所述陽性對照液為分別含有三種不同ALDH2等位基因的三種細胞系DNA，所述空白對照液為TE緩沖液。
6.權利要求1-3中任一項所述的引物和探針組合在制備檢測人類ALDH2基因多態性試劑盒中的應用。
7.權利要求1-3中任一項所述的引物和探針組合，或者權利要求4或5所述的試劑盒在檢測人類ALDH2基因多態性中的應用。
8.一種檢測人類ALDH2基因多態性的方法，其包含以下步驟：
(1)獲取待測樣品基因組DNA、直接使用待測血液樣品、或者直接使用待測濾紙干血片樣品；
(2)采用權利要求1-3中任一項所述的引物和探針組合，或者采用權利要求4或5所述的試劑盒，以步驟(1)中獲取的基因組DNA、血液樣品或者濾紙干血片樣品為模板，進行熒光PCR擴增；
(3)收集熒光信號，將數據結果導入TaqMan Genotyper軟件中進行分析。
9.根據權利要求8所述的方法，其中直接使用待測血液樣品或者待測濾紙干血片樣品為模板進行熒光PCR擴增。
10.根據權利要求8或9所述的方法，其中每條引物的濃度為300nM，每條探針的濃度為200nM，熒光PCR反應程序為：50℃預處理3分鐘，95℃預變性15分鐘，預變性后按照以下程序進行40個循環：95℃15秒，60℃32秒；50℃數據讀取1分鐘；如果模板為血液樣品或者濾紙干血片樣品，則將循環數增至45。
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