[發(fā)明專利]水稻香味基因fgr功能標(biāo)記及其專用引物序列

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710114081.1
• 申請(qǐng)日: 2017-02-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106702004A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧國(guó)富;周維永;卿冬進(jìn);高利軍;戴高興;黃娟;高菊;梁海福;周萌;陳仁天;陳韋韋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西作物遺傳改良生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室;廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙)44248
• 代理人: 胡吉科

1.一種水稻香味基因fgr功能標(biāo)記的專用引物序列，其特征在于，所述水稻香味基因fgr的香味等位基因的顯性分子標(biāo)記M-fgr由三條引物構(gòu)成：

fgrF引物：ttgtttggagcttgctgatg；

fgrIn引物：AACCATAGGAGCAGgTGAAAT；

fgrR引物：acaaagtcccgcacttcaga。

2.一種水稻香味基因fgr功能標(biāo)記，其特征在于，采用以下步驟進(jìn)行分子標(biāo)記：

步驟S1：提取水稻植株的基因組DNA；

步驟S2：PCR 擴(kuò)增：以步驟S1的水稻植株基因組DNA為模板，將權(quán)利要求1所述的fgrF、fgrIn和fgrR引物加入到PCR反應(yīng)體系中，對(duì)所述的水稻植株基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增得到擴(kuò)增產(chǎn)物；

步驟S3：將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在質(zhì)量百分比濃度為1.2%的包含有GelRed核酸染料的瓊脂糖凝膠中電泳，然后在紫外燈下觀察并拍照獲得電泳圖；

步驟S4：根據(jù)電泳圖進(jìn)行分析。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的水稻香味基因fgr功能標(biāo)記，其特征在于：進(jìn)行電泳圖分析時(shí)，如果同時(shí)含有569bp和260bp兩條特征條帶，則為含有香味fgr等位基因，表型為香味品種；如果僅含有569bp的特征條帶，則為不含香味fgr等位基因，表型為非香味品種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的水稻香味基因fgr功能標(biāo)記，其特征在于，所述PCR反應(yīng)體系為20 μL的體系：2.0 μL的10×PCR Buffer；0.5 μL的10 mM dNTPs；5 μM的fgrF引物1.0 μL；5 μM的fgrIn引物1.0 μL；5 μM的fgrR引物1.0 μL；0.2 μL 的Taq DNA聚合酶，2.0 μL的模板DNA，12.3 μL的ddH₂O。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水稻香味基因fgr功能標(biāo)記，其特征在于：所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序?yàn)椋?4 ℃預(yù)變性5 min ；94℃變性30 sec、58℃退火45 sec、72℃延伸1 min，循環(huán)35次；然后72℃延伸5 min 后得到擴(kuò)增產(chǎn)物。