[發明專利]一種遠紅色熒光蛋白、融合蛋白、分離的核酸、載體和應用

有效

• 申請號: 201710106129.4
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN106831971B
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 儲軍;張楚秋;郭育奇;張書;劉豐
• 申請（專利權）人: 中國科學院深圳先進技術研究院
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C12N15/12;A61K49/00
• 代理公司: 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316
• 代理人: 曹衛良

本發明公開了一種遠紅色熒光蛋白、融合蛋白、分離的核酸、載體和應用，屬于生物醫學光學與分子影像學技術領域。本發明公開的遠紅色熒光蛋白相對于熒光蛋白mMaroon1包括以下氨基酸突變位點：S128A、R157Y、F194A、D223T、P225G以及第226?234位氨基酸片段的缺失。本發明提供的遠紅色熒光蛋白具有良好的單體性，易于與其他蛋白融合或相互作用，能夠提高成像效率和改善成像效果。

技術領域

本發明涉及生物醫學光學與分子影像學技術領域，具體而言，涉及一種遠紅色熒光蛋白、融合蛋白、分離的核酸、載體和應用。

背景技術

熒光蛋白可以通過基因調控使其在特定的時間和空間上進行表達，它能夠與其它的蛋白序列融合從而被用作光學探針或者生物光學反應器的組成成分。但熒光蛋白應用于活體內成像時，常常存在組織細胞自發熒光、光散射以及血紅蛋白光吸收等干擾，導致成像效率低、成像效果差等問題。遠紅色熒光蛋白由于它的激發峰和發射峰的波長較長(600nm以上)，因此，它可以很好的解決上述問題。

但是，現有的遠紅色熒光蛋白存在較為典型的缺陷：蛋白呈二聚體或四聚體，這將導致其融合性能差，不利于檢測蛋白間的相互作用；此外，還存在蛋白具有較低的消光系數和量子產率，這將導致成像效果差，清晰度低，敏感性弱等問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種遠紅色熒光蛋白，該遠紅色熒光蛋白具有較好的單體性，融合性能好，有助于檢測蛋白間的相互作用。

本發明的再一目的在于提供一種融合蛋白，該融合蛋白含有上述的遠紅色熒光蛋白。

本發明的另一目的在于提供一種分離的核酸，用于編碼上述的遠紅色熒光蛋白。

本發明的另一目的在于提供一種載體，其含有上述的核酸。

本發明的另一目的在于提供含有上述載體的重組細胞。

本發明的另一目的在于提供上述的遠紅色熒光蛋白在作為熒光共振能量轉移受體或供體中的應用。

本發明的另一目的在于提供上述的遠紅色熒光蛋白在活體成像中的應用。

本發明是這樣實現的：

一種遠紅色熒光蛋白，其相對于熒光蛋白mMaroon1包括以下氨基酸突變位點：S128A、R157Y、F194A、D223T、P225G以及第226-234位氨基酸片段的缺失。

一種融合蛋白，其含有上述的遠紅色熒光蛋白。

一種分離的核酸，其編碼上述的遠紅色熒光蛋白。

一種載體，其含有上述的核酸。

含有上述載體的重組細胞。

上述的遠紅色熒光蛋白在作為熒光共振能量轉移受體或供體中的應用。

上述的遠紅色熒光蛋白在活體成像中的應用。

與現有技術相比，本發明提供的一種遠紅色熒光蛋白、融合蛋白、分離的核酸、載體和應用的有益效果是：

本發明提供的遠紅色熒光蛋白，其相對于現有的熒光蛋白mMaroon1包括S128A、R157Y、F194A、D223T、P225G以及第226-234位氨基酸片段的缺失等氨基酸突變位點，通過上述氨基酸位點的突變和缺失，避免了二聚體的形成，大大地改善了遠紅色熒光蛋白的單體性，是的該遠紅色熒光蛋白具有了良好的單體性能，使其易于與其他蛋白融合或相互作用，有助于提高成像效率和改善成像效果。

附圖說明