[發(fā)明專利]一種高效液相色譜梯度法同時測定萘普替尼光降解產(chǎn)物及其它有關(guān)物質(zhì)的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710096465.5
• 申請日: 2017-02-22
• 公開（公告）號: CN106908531B
• 公開（公告）日: 2019-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉小柔;佘琴;朱丹;石濤;楊經(jīng)安;金鋒;唐田
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳海王醫(yī)藥科技研究院有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京律誠同業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11006
• 代理人: 黃韌敏

本發(fā)明公開了一種萘普替尼的高效液相色譜分析法，具體是色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱(100×4.6mm，3.5μm)，以磷酸鹽緩沖液?甲醇(82∶18)為流動相A，以磷酸鹽緩沖液?甲醇(40：60)為流動相B，梯度洗脫，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min，檢測波長為247nm；取萘普替尼或萘普替尼制劑，加流動相A制成濃度為0.5mg/ml的溶液，作為供試品溶液；取萘普替尼對照品，加流動相A制成濃度為0.005mg/ml的溶液，作為對照品溶液。分別進樣，按外標法以峰面積計算，供試品溶液的色譜圖中各雜質(zhì)峰面積的和不得超過1.0％。本發(fā)明首次測定了萘普替尼光降解產(chǎn)物及其它有關(guān)物質(zhì)的含量，未見相關(guān)文獻報導(dǎo)。可快速準確的檢測出萘普替尼的光降解產(chǎn)物及其它雜質(zhì)，操作簡單，重現(xiàn)性好，靈敏度高，可較好地控制萘普替尼產(chǎn)品質(zhì)量，為合成和制劑工藝優(yōu)化提供了保證。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及萘普替尼原料及其相關(guān)制劑的分析方法，具體涉及一種用高效液相色譜梯度法進行測定的方法，屬于藥物分析檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)

萘普替尼是一種苯胺喹唑啉類抗癌新藥，臨床擬用于晚期非小細胞肺癌的治療。其化學(xué)名稱為(E)-N-[4-(3-氯-4-氟苯基)氨基)-7-乙氧基喹唑啉-6-基]-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺二甲苯磺酸鹽結(jié)晶水合物，分子式為C₂₂H₂₃ClFN₅O₂·(C₇H₈O₃S)₂，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

萘普替尼在合成和儲藏過程中在2位雙鍵上容易產(chǎn)生順式異構(gòu)體，另同時也可能存在各中間體、副產(chǎn)物和降解產(chǎn)物，采用一般的分析方法難于分離萘普替尼與它的光學(xué)異構(gòu)體，本文通過調(diào)節(jié)不同的流動相組成、比例、不同的洗脫方式，不同的PH值及不同的無機鹽濃度首次實現(xiàn)了同時測定萘普替尼光降解產(chǎn)物及其它相關(guān)有關(guān)物質(zhì)的目的，很好地保證了萘普替尼原料的質(zhì)量可控，具有現(xiàn)實意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高效液相色譜梯度法同時測定萘普替尼光降解產(chǎn)物及其它有關(guān)物質(zhì)的方法，可用于萘普替尼制備過程及最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制。

本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種高效液相色譜梯度法同時測定萘普替尼光降解產(chǎn)物及其它相關(guān)有關(guān)物質(zhì)的方法，其特征在于，該檢測方法包括以下步驟：

(1)制備標準品溶液

以所述標準品溶液在下述色譜條件下進行系統(tǒng)適用性試驗，校定檢測系統(tǒng)：

色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠柱，以磷酸鹽緩沖液-甲醇(82∶18)為流動相A，以磷酸鹽緩沖液-甲醇(40∶60)為流動相B，梯度洗脫，磷酸鹽緩沖液的濃度為0.04～0.1mol/L，pH值為7.0～7.8，柱溫為25～35℃，流速為0.9～1.1ml/min，檢測波長為247nm；

標準品溶液制備：分別取起始原料、中間體1、中間體2、中間體3、雜質(zhì)A、光照產(chǎn)物(雜質(zhì)B)和萘普替尼對照品加流動相A制成每1ml中約含0.0025～0.5mg的混合溶液；

精密量取10μl所述混合溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，校定檢測系統(tǒng)至萘普替尼主峰與相鄰雜質(zhì)B的峰的分離度應(yīng)大于1.5，理論板數(shù)和拖尾因子按萘普替尼主峰計算應(yīng)不低于10000和不大于1.5；

(2)制備供試品溶液和對照品溶液

取萘普替尼待測樣品，加流動相A制成濃度為0.5mg/ml的溶液，作為供試品溶液；取萘普替尼對照品，加流動相A制成濃度為0.005mg/ml的溶液，作為對照品溶液。

(3)通過高效液相色譜測定待測樣品中雜質(zhì)B及相關(guān)有關(guān)物質(zhì)的含量