[發明專利]血漿microRNAs用于制備篩查診斷女性群體中肺腺癌患者的診斷試劑的用途

有效

• 申請號: 201710088718.4
• 申請日: 2017-02-20
• 公開（公告）號: CN106755521B
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 郭守河
• 申請（專利權）人: 南京蓋斯夫醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了血漿microRNAs用于制備篩查診斷女性群體中肺腺癌患者的診斷試劑的用途，由如下microRNAs組成：miR?224?3p、miR?146a?5p、miR?648、miR?523?5p、miR?758?5p；miR?224?3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；miR?146a?5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；miR?648的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；miR?523?5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；miR?758?5p的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。本發明提供的血漿microRNAs標記物可以準確用于篩查診斷女性群體中肺腺癌患者，靈敏度高，特異性強，實現女性群體中肺腺癌患者的無介入診斷。

技術領域

本發明屬于臨床診斷領域，涉及肺腺癌篩查診斷試劑，具體涉及血漿microRNAs用于制備篩查診斷肺腺癌患者的診斷試劑的用途。

背景技術

肺癌是全球最常見的惡性腫瘤，死亡率居惡性腫瘤之首。我國肺癌發病率呈現逐年上升趨勢，年平均增長近2％。肺癌根據病理學特點的不同分為多種組織類型，肺癌組織類型不同，其治療措施也不同。根據2004版WHO分類，常見肺癌組織病理學分型分為非小細胞癌(NSCLC)和小細胞癌(SCLC)。非小細胞癌又分為鱗狀細胞癌(SCC)、腺癌(AC)和大細胞癌(LCC)。不同肺癌臨床治療方案不同，預后效果也不同。因此，為了提高治療效果，肺癌的治療策略已經從傳統的以分期為基礎的治療模式轉變為以組織學類型和基因突變為指導的個體化、精準的多學科治療模式。個體化治療提高了肺癌的治療和預后效果。

腺癌作為最常見的肺癌組織學類型，在全球及我國發病率均呈上升趨勢。流行病學研究結果顯示，非小細胞肺癌的發病有明顯的性別差異，尤其是腺癌。腺癌占原發肺癌的50％，是非吸煙患者的主要組織學類型。目前在肺癌研究最深入、臨床應用最多的是針對表皮生長因子受體EGFR的小分子酪氨酸激酶抑制劑，而易瑞沙、吉非替尼和厄洛替尼是其主要的代表。隨著對這類小分子靶向治療藥物研究的深入，逐漸發現其療效與肺癌患者的臨床特征相關，其中亞裔、女性、腺癌、不吸煙是其臨床“優勢人群”的主要特征(楊新杰等，鹽酸埃克替尼一線治療晚期肺腺癌的臨床療效觀察，中國肺癌雜志2013年7月；馬智勇等，易瑞沙治療男性、不吸煙或輕度吸煙的晚期肺腺癌患者療效研究，醫藥論壇雜志2010年11月)。

這些結果讓研究者得出一個推測：腺癌在男性和女性中的發病率、發病機制和臨床治療效果均存在差異。為了適應個性化治療，腺癌的研究有必要分性別開展。

復旦大學附屬中山醫院黃威博士在畢業論文“三種病理亞型肺癌組織中腫瘤標記物的發現、驗證及其靶基因的初步篩選”中詳細研究了用于肺癌診斷的microRNAs標記物。首先，作者應用激光捕獲顯微切割技術從44例正常肺組織、36例腺癌、30例鱗癌及16例小細胞癌中獲取純的上皮細胞和腫瘤細胞，進行全基因組microRNAs表達分析，經過方差分析和聚類分析發現16個差異表達的microRNAs可以區分三種肺癌病理亞型(肺腺癌、肺鱗癌和小細胞肺癌)，并最終確定其中的7個作為候選標記物進行進一步驗證；然后，作者在三種病理亞型肺癌組織中驗證7個候選microRNAs腫瘤標記物，建立診斷肺癌病理亞型的回歸模型，并且分析7個候選microRNAs的預后價值，結果發現：單個候選microRNA鑒別正常肺組織與肺腺癌的AUC值不理想，經過Logistic回歸分析建立模型發現hsa-miR-375和hsa-miR-34a兩個相互配合可以得到最佳AUC 0.910，敏感性80％，特異性97％，敏感度較低。也就是說，經過作者的研究，無論是單個microRNA還是多個microRNAs的聯合均不能有效診斷區分正常肺組織與肺腺癌，準確度和敏感度不盡如人意。而且，該方法是一種基于組織中標志物的方法，需要取患者的肺組織用于檢測，依然是一種介入診斷方法，不方便。

申請人認為，上述博士論文未能篩選出有效診斷區分正常肺組織與肺腺癌的microRNAs的關鍵原因在于忽視了肺腺癌的性別差異，樣本分類錯誤，自然無法得出理想結果。

發明內容