[發(fā)明專利]一種抗枯萎病生物有機肥及其制備方法

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• 申請日: 2017-02-17
• 公開（公告）號: CN106748300A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設計）人: 胡偉
• 申請（專利權）人: 湖南科技大學
• 主分類號: C05G3/00
• 分類號: C05G3/00;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京國昊天誠知識產權代理有限公司11315
• 代理人: 許志勇

1.一種抗枯萎病生物有機肥，其特征在于，按照質量份包括以下組分：有機肥50-150份和含菌沸石粉1份。

2.根據(jù)權利要求1所述的抗枯萎病生物有機肥，其特征在于，所述有機肥為非動物源原料發(fā)酵有機肥，所述非動物源原料發(fā)酵有機肥總無機養(yǎng)分不高于6％，有機質大于30％，pH為5.0-8.5，水分小于等于30％。

3.根據(jù)權利要求1所述的抗枯萎病生物有機肥，其特征在于，所述含菌沸石粉通過以下方法制備得到：將沸石粉碎并過100目篩，150-200℃干熱滅菌20-60min后冷卻，將滅菌后的沸石與AF11b菌液按照質量體積比(g/mL)為1:10-2:1的比例放入攪拌機內進行混合，攪拌速度為30-90轉/min，混合時間為20-40min，靜置6-18h后去除上清液，將沉淀取出烘干，烘干溫度為40-80℃，時間為4-12h，烘干后的沸石進行粉碎，制備成含菌沸石粉。

4.根據(jù)權利要求3所述的抗枯萎病生物有機肥，其特征在于，AF11b菌株菌液通過以下方法制備得到：選擇利福平作為菌株AF11的標記抗生素，挑選在100μg/mL濃度水平下具備拮抗效果的突變菌株作為抗性標記菌株，定名為AF11b；將菌株AF11b放置于32℃培養(yǎng)箱24h活化，將活化好的菌株放入10L-50L-500L三級自動發(fā)酵罐中進行擴繁，培養(yǎng)基采用細菌培養(yǎng)基；擴繁中溫度控制在30-35℃之間，當菌液OD₆₀₀值大于等于0.9時，發(fā)酵終止；制備得到菌株AF11b菌液，其中，細菌培養(yǎng)基具體為：每L培養(yǎng)基中含蛋白胨10g、酵母提取物5g和氯化鈉10g。

5.一種抗枯萎病生物有機肥的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、制備菌株AF11b菌液；

步驟2、制備含菌沸石粉；

步驟3、將有機肥與含菌沸石粉按質量比為50-150:1混合均勻后裝入封口袋中，28℃恒溫保存，保存時間不得低于90d，制備得到抗枯萎病生物有機肥。

6.根據(jù)權利要求5所述的抗枯萎病生物有機肥的制備方法，其特征在于，所述步驟1中制備菌株AF11b菌液具體為：選擇利福平作為菌株AF11的標記抗生素，挑選在100μg/mL濃度水平下具備拮抗效果的突變菌株作為抗性標記菌株，定名為AF11b；將菌株AF11b放置于30-25℃培養(yǎng)箱20-28h活化，將活化好的菌株放入10L-50L-500L三級自動發(fā)酵罐中進行擴繁，培養(yǎng)基采用細菌培養(yǎng)基；擴繁中溫度控制在30-35℃之間，當菌液OD₆₀₀值大于等于0.9時，發(fā)酵終止；制備得到菌株AF11b菌液。

7.根據(jù)權利要求6所述的抗枯萎病生物有機肥的制備方法，其特征在于，所述細菌培養(yǎng)基具體為：每L培養(yǎng)基中含蛋白胨10g、酵母提取物5g和氯化鈉10g。

8.根據(jù)權利要求5所述的抗枯萎病生物有機肥的制備方法，其特征在于，所述步驟2中制備含菌沸石粉具體為：將沸石粉碎并過100目篩，150-200℃干熱滅菌20-60min后冷卻，將滅菌后的沸石與AF11b菌液按照質量體積比(g/mL)為1:10-2:1的比例放入攪拌機內進行混合，攪拌速度為30-90轉/min，混合時間為20-40min，靜置6-18h后去除上清液，將沉淀取出烘干，烘干溫度為40-80℃，時間為4-12h，烘干后的沸石進行粉碎，制備成含菌沸石粉。

9.根據(jù)權利要求5所述的抗枯萎病生物有機肥的制備方法，其特征在于，所述有機肥為非動物源原料發(fā)酵有機肥，所述非動物源原料發(fā)酵有機肥總無機養(yǎng)分不高于6％，有機質大于30％，pH為5.0-8.5，水分小于等于30％。