[發(fā)明專利]一種富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710083312.7
• 申請(qǐng)日: 2017-02-16
• 公開（公告）號(hào): CN106893679A
• 公開（公告）日: 2017-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉鐵平;孫勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇中祥高科技實(shí)業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 鎮(zhèn)江京科專利商標(biāo)代理有限公司32107
• 代理人: 夏哲華

1.一種富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

A:芝深層發(fā)酵培養(yǎng)

a、靈芝菌種培養(yǎng)：培養(yǎng)溫度為25～26℃，

取靈芝菌種在菌種培養(yǎng)基中培養(yǎng)20～30天，所述菌種培養(yǎng)基的配方組成為：馬鈴薯200～250g、葡萄糖20～25g、磷酸二氫鉀3～4g、七水硫酸鎂1.5～2g、維生素B110～20mg、瓊脂18～20g、水1000ml；

b、搖床種：保持溫度在25～26℃，在30L攪拌罐中裝入所述步驟1)中培養(yǎng)有靈芝菌種的菌種培養(yǎng)基，用水稀釋，然后置于振蕩器上，攪拌3～4天，控制攪拌速度為100～120轉(zhuǎn)/min；

c、一級(jí)放大：保持溫度在25～26℃，將所述步驟b中稀釋攪拌后的培養(yǎng)基負(fù)壓吸入300L種子罐中，培養(yǎng)2～3天；

d、二級(jí)放大：保持溫度在25～26℃，將所述步驟c中攪拌后的培養(yǎng)基負(fù)壓吸入1.5噸的種子罐中，培養(yǎng)2～3天；

e、發(fā)酵培養(yǎng)：保持溫度在25～26℃，將所述步驟d中培養(yǎng)后的培養(yǎng)基負(fù)壓吸入7噸的發(fā)酵罐中，并加入發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，所述發(fā)酵培養(yǎng)基含有無機(jī)硫酸亞鐵；

B、將7噸發(fā)酵罐中的靈芝發(fā)酵原液升溫至45~55℃，加入20000u/g的酸性纖維素酶，加入量為發(fā)酵罐實(shí)際裝量的0.0001~0.0004%，攪拌酶解3~4小時(shí)，得到靈芝酶解液；

C、將上述靈芝酶解液降至40~45℃，并加入質(zhì)量濃度為10%的NaOH溶液，調(diào)節(jié)pH至7.0~9.0，加入發(fā)酵罐實(shí)際裝量的0.006~0.012%的復(fù)合蛋白酶，攪拌酶解3~5小時(shí)，升溫至85~95℃，滅酶活10~30分鐘；

D、板框壓濾：將所述步驟C酶解靈芝混合液取出，用50～60kg的壓力壓濾，除去固體物，得到靈芝酶解原液；

E、經(jīng)過板框壓濾后形成靈芝菌絲體，然后對(duì)靈芝菌絲體真空干澡并粉碎得到富鐵靈芝菌絲體粉。

2.按照權(quán)利要求1所述的富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于：按質(zhì)量百分?jǐn)?shù)計(jì)，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方組成為：玉米粉1～3％、蔗糖2～4％、無機(jī)硫酸亞鐵0.01～0.02％，磷酸二氫鉀0.01～0.02％、硫酸銨0.2～0.3％、酵母粉0.2～0.4％、豆油0.05～0.1％、余量為水；

按照權(quán)利要求1所述的富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟C中復(fù)合蛋白酶的質(zhì)量組成為：

10萬u/g的中性蛋白酶35%

20萬u/g的堿性蛋白酶35%

10萬u/g胰蛋白酶 10%

10萬u/g的木瓜蛋白酶15%

10萬u/g的糖肽酶 5%

按照權(quán)利要求1所述的富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達(dá)到以下標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，發(fā)酵結(jié)束：待靈芝菌絲上無明顯芽頭和鎖狀聯(lián)合現(xiàn)象，且菌絲變細(xì)，菌絲原生質(zhì)凝集，菌絲有自溶現(xiàn)象發(fā)生時(shí)。

3.按照權(quán)利要求1所述的富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達(dá)到以下標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，發(fā)酵結(jié)束：菌絲濕重達(dá)到15～20％。

4.按照權(quán)利要求1所述的富鐵靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述步驟A中e工序中，待達(dá)到以下標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，發(fā)酵結(jié)束：發(fā)酵原液的pH值為3.0～3.5。