[發明專利]一種磷酸鹽緩沖液及其制備方法

有效

• 申請號: 201710079814.2
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN108426761B
• 公開（公告）日: 2021-11-05
• 發明（設計）人: 劉峻
• 申請（專利權）人: 上海瀚聯醫療技術股份有限公司
• 主分類號: G01N1/38
• 分類號: G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種磷酸鹽緩沖液的配制方法，在所述5L濃縮液磷酸鹽緩沖液中，包括：磷酸二氫鉀，其添加濃度為0.55wt％；二水合磷酸氫二鈉，其添加濃度為2.37—2.38wt％；氯化鉀，其添加濃度為1.50wt％；硝酸鈉，其添加濃度為0.19％—0.20wt％；二水合依地酸二鈉，其添加濃度為0.38—0.40wt％；TritonX?100，其添加濃度為0.05—0.055wt％，所述溶劑為水。本發明的緩沖液在配置過程不會產生大量泡沫；且工藝簡單操作，效率提高很多，易于控制其PH值和電導率。

技術領域

本發明涉及一種磷酸鹽緩沖液及其制備方法。

背景技術

濃縮液主要成分是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。它是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4.2H2O、KH2PO4、NaNO3、KCl，TritonX-100等，作為體外診斷試劑所用的10倍濃縮液，所以研究其技術指標主要涉及的是PH值和電導率(電導率間接反映溶液的滲透壓，因為滲透壓取決于溶質的分子數)，再根據相關技術，發現PH值在6.8-7.3，電導率在42-44ms/cm范圍的10倍濃縮液稀釋成稀釋液測試血糖和乳酸得出的測試結果更加符合標準，并且CV≤2.0％。市場上磷酸鹽緩沖溶液配置工藝，生產的緩沖溶液滲透壓可以達到280-320smolL，PH值可以達到7.1-7.2，一般用于葡萄糖/乳酸分析儀、分子克隆及細胞培養，pH＝7.4，與人體血液等滲細胞內外液之間保持著一個平衡等滲狀態，而一方出現異常，將會打破內環境的穩態，對測試結果就會產生不利影響。滲透壓是調節細胞內外體液環境穩定的重要因素，其高低變化可以直接影響機體的生理功能和代謝活動，因此對于試劑研究員來說，配液過程中及時考慮每個試劑本身對滲透壓的影響，在符合國家標準的過程中，向臨床提供等滲的溶液，以盡可能的避免用藥異常現象發生。

再者配置濃縮液中需要用到的tritonX-100和Parmetol K40，也是溶液中必須的兩種有機化合物，對于這兩中化學試劑的添加工藝，結果實驗室多次研發確認，再結合國外給出的一些技術支持，確定在完全溶解磷酸二氫鉀，二水合磷酸氫二鈉，氯化鉀，硝酸鈉，二水合EDTA-2Na后，攪拌轉速設定120-150轉/分鐘，攪拌頻率設定為40-50HZ，勻速攪拌下，先緩慢滴加0.05％-0.055％的TritonX-100，待其完全溶解后，再緩慢逐滴加入5.00mL-6.00ml左右的K40，最后加超純水至5L刻度線處，繼續攪拌30min，得到灌裝前的濃縮液，進而稀釋成稀釋液與血細胞正常狀態下的pH值、滲透壓一致，維持滲透壓、酸堿平衡，進而測試得到的數據更加具有說服力。

發明內容

本發明包含一種磷酸鹽緩沖液，在5L濃縮液磷酸鹽緩沖液中，包括：磷酸二氫鉀，其添加濃度為0.55wt％；二水合磷酸氫二鈉，其添加濃度為2.37—2.38wt％；氯化鉀，其添加濃度為1.50wt％；硝酸鈉，其添加濃度為0.19％—0.20wt％；二水合依地酸二鈉，其添加濃度為0.38—0.40wt％；TritonX-100，其添加濃度為0.05—0.055wt％，所述溶劑為水。

優選地，所述緩沖液還包含ParmetolK40。

優選地，所述溶劑為超純水。

本發明還公開了一種制備上述緩沖液的工藝方法，包含以下技術特征：

(1)裝3L水于5L量杯中，將量杯置于磁力攪拌器上，讓所述磁力攪拌器內的攪拌轉子勻速轉動；

(2)依次向5L量杯中加入磷酸二氫鉀，二水合磷酸氫二鈉，氯化鉀，硝酸鈉，二水合依地酸二鈉，直至上述原材料完全溶解后攪拌下加入TritonX-100；溶解上述的所有無機鹽應該預先準備溶劑體積的60％預先溶解，方可避免泡沫的產生；二水合依地酸二鈉，其添加濃度為0.38—0.40wt％，根據發明人的大量實驗得出，加入上述百分含量抗凝效果最優，該范圍以外將會使溶液凝聚；

(3)等上述原材料都完全溶解后，然后再向5L量杯中加滿水至刻度線處；