[發明專利]基于高嶺土的適用于甲基對硫磷降解菌的固定化載體

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• 申請號: 201710069691.4
• 申請日: 2017-02-08
• 公開（公告）號: CN106834265A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 光合強化（北京）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;C02F3/34;C01B33/40;C02F101/38
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• 代理人: 暫無信息

1.一種基于高嶺土的適用于甲基對硫磷降解菌的固定化載體，其特征在于，制備該固定化載體方法的具體步驟如下：

(1)向750mL質量百分比濃度為8％的硝酸銨溶液中加入44.8克高嶺土，在1000r/min條件下攪拌50分鐘，過濾除去液體，經500mL去離子水洗滌后在105℃的干燥箱中放置55分鐘，得到物質A；

(2)將5.7克1,4-二氨基蒽醌加入到1200mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，搖勻后分成等量3份，得到混合液M1、混合液M2、混合液M3；

(3)將4.8克鹽酸苯肼和7.7克2,3,4-三甲氧基苯甲醛加入到150mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，搖勻后分成等量3份，得到混合液N1、混合液N2、混合液N3；

(4)將混合液M1和8.8克2-噻吩乙酰氯加入到混合液N1中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液O1；

(5)將物質A加入到混合液O1中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質A1，將物質A1在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質A2；

(6)將混合液M2和8.0克2-噻吩乙酰氯加入到混合液N2中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液O2；

(7)將物質A2加入到混合液O2中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質A3，物質A3在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質A4；

(8)將混合液M3和7.2克2-噻吩乙酰氯加入到混合液N3中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液O3；

(9)將物質A4加入到混合液O3中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質A5，物質A5在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質B；

(10)將5.5克單寧酸和4.9克吡唑蒽酮加入到900mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，搖勻后分成等量3份，得到混合液P1、混合液P2、混合液P3；

(11)將9.4克八甲基環四硅氧烷和5.3克2-氯-4-氟苯甲酸加入到混合液P1中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液Q1；

(12)將物質B加入到混合液Q1中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B1，物質B1經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質B2；

(13)將8.4克八甲基環四硅氧烷和6.3克2-氯-4-氟苯甲酸加入到混合液P2中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液Q2；

(14)將物質B2加入到混合液Q2中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B3，物質B3經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質B4；

(15)將7.4克八甲基環四硅氧烷和7.3克2-氯-4-氟苯甲酸加入到混合液P3中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液Q3；

(16)將物質B4加入到混合液Q3中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質B5，物質B5經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質C；

(17)將22.3克3-氨基-4-乙氧羰基吡唑加入到500mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，搖勻后分成等量2份，得到混合液R1、混合液R2；

(18)將6.8克N,N-二異丙基乙胺和4.7克3-(乙基氨基)-4-甲酚加入到混合液R1中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液S1；

(19)將物質C加入到混合液R1中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，過濾除去液體得到物質C1，物質C1經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質C2；

(20)將5.8克N,N-二異丙基乙胺和5.7克3-(乙基氨基)-4-甲酚加入到混合液R2中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液S2；

(21)將物質C2加入到混合液S2中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，過濾除去液體得到物質C3，物質C3經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質D；

(22)將5.9克對氯苯乙腈加入到900mL無水乙醇中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，搖勻后分成等量3份，得到混合液T1、混合液T2、混合液T3；

(23)將3.9克苯并咪唑-2-甲醛和7.7克丙酮苯腙加入到混合液T1中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液U1；

(24)將物質D加入到混合液U1中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質D1，物質D1經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質D2；

(25)將4.9克苯并咪唑-2-甲醛和6.7克丙酮苯腙加入到混合液T2中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液U2；

(26)將物質D2加入到混合液U2中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質D3，物質D3經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到物質D4；

(27)將5.9克苯并咪唑-2-甲醛和5.7克丙酮苯腙加入到混合液T3中，在1000r/min條件下攪拌5分鐘，得到混合液U3；

(28)將物質D4加入到混合液U3中，在溫度為35℃的搖床中搖動25分鐘，過濾除去液體得到物質D5，物質D5經100mL質量百分比濃度為92％的乙醇洗滌后在105℃的干燥箱中放置120分鐘，得到的物質即為基于高嶺土的適用于甲基對硫磷降解菌的固定化載體。