[發(fā)明專利]鑒別栽培黑麥與野生黑麥染色體的分子檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710067844.1
• 申請(qǐng)日: 2017-02-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106755507B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊足君;李光蓉;郎濤;張潔;王宏晉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 電子科技大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6841
• 分類號(hào): C12Q1/6841;C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 夏艷

本發(fā)明公開(kāi)了一種鑒別栽培黑麥與野生黑麥染色體的分子檢測(cè)方法，其中，分子標(biāo)記包括分子探針序列pSa193和分子探針序列pSyCTT，所述分子探針序列pSa193的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述分子探針序列pSyCTT如SEQ ID NO.2所示。本發(fā)明還公開(kāi)了一種鑒別黑麥野生型和栽培型的分子標(biāo)記方法，本發(fā)明創(chuàng)造了區(qū)分野生黑麥和栽培黑麥染色體的差異性分子熒光原位雜交技術(shù)，可以為繼續(xù)開(kāi)展栽培黑麥和野生黑麥基因?qū)胄←湥_(kāi)展小麥分子育種服務(wù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物分子檢測(cè)與鑒別領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種鑒別栽培黑麥與野生黑麥染色體的分子檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

黑麥屬(Secale，2n＝14，染色體組R)作為小麥的三級(jí)基因源，蘊(yùn)藏著豐富的遺傳變異，具有許多優(yōu)異的農(nóng)藝性狀，如抗逆性強(qiáng)、抗白粉病、銹病、腥黑穗病和大麥黃矮病及蚜蟲(chóng)等多種病害，根系發(fā)達(dá)、分蘗能力強(qiáng)、穗大、小穗多、籽粒中賴氨酸和蛋白質(zhì)含量高等，是改良普通小麥產(chǎn)量、抗逆性和抗病性的重要基因資源。黑麥屬(Secale)有普通栽培黑麥(S.cereale)、山地黑麥(S.montanum)、非洲黑麥(S.africanum)、瓦維洛夫黑麥(S.vavilovii)和森林黑麥(S.sylivestre)等5個(gè)種。而如何將黑麥屬植物的優(yōu)良基因?qū)氲狡胀ㄐ←溨校墙┠昕蒲腥藛T研究的熱點(diǎn)(Tang ZX,Ross K,Ren ZL,Yang ZJ,ZhangHY,Chikmawati T,Miftahudin,Gustafson JP(2011)Wealth of wild species:Role inplant genome elucidation and improvement-Secale.In:Wild Crop Relatives:Genomic and Breeding Resources Cereals.Edited by Kole C.Springer.pp.367-395.)。以遠(yuǎn)緣雜交結(jié)合染色體工程結(jié)合的方法，將黑麥屬優(yōu)異基因?qū)氲叫←湥渲幸栽耘嗪邴?RS.1BL易位系的育成并在全世界小麥生產(chǎn)中的應(yīng)用，最為成功(曹新有，陳雪燕，陳朝輝，王燦國(guó)，吉萬(wàn)全，劉建軍.2014.黑麥屬優(yōu)異基因在小麥改良中的研究與應(yīng)用。農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào)，22：1035-1045.)。但申請(qǐng)者發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)移野生黑麥物種，包括非洲黑麥、森林黑麥等野生黑麥的優(yōu)異基因轉(zhuǎn)移研究相對(duì)缺乏，主要由于對(duì)野生黑麥染色質(zhì)在小麥背景中的準(zhǔn)確鑒定較難，且不易與栽培黑麥染色質(zhì)的有效區(qū)分(Lei MP,Li GR,Zhou L,Li CH,Liu C,Yang ZJ.2013.Identification of wheat-Secale africanum chromosome 2R^afrintrogression lines with novel disease resistance and agronomiccharacteristics.Euphytica 194(2):197-20；An D,Zheng Q,Luo Q,Ma P,Zhang H,Li L,Han F,Xu H,Xu Y,Zhang X,Zhou Y.2015.Molecular cytogenetic identification of anew wheat-rye 6R chromosome disomic addition line with powdery mildewresistance.PLoS ONE 10(8):e0134534.)。因此，如何對(duì)不同的黑麥供體物種染色體的進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定與追蹤顯得十分重要。目前，相關(guān)研究只能對(duì)栽培黑麥染色體進(jìn)行鑒定，不能檢測(cè)和區(qū)分野生黑麥，識(shí)別具體為那一條染色體(Schneider A,Rakszegi M,Molnár-Láng M,Szakács E.2016.Production and cytomolecular identification of new wheat-perennial rye(Secale cereanum)disomic addition lines with yellow rustresistance(6R)and increased arabinoxylan and protein content(1R,4R,6R).Theoretical and Applied Genetics 129(5)：1045-1059.)。因此，迫切需要開(kāi)發(fā)新型的黑麥染色體鑒定新方法，大幅度提高小麥背景中野生和栽培黑麥的鑒定效率，為分子染色體工程育種服務(wù)。