[發明專利]一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法

在審

• 申請號: 201710065119.0
• 申請日: 2017-02-06
• 公開（公告）號: CN108391746A
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發明（設計）人: 萬端極;吳正奇;徐國念;李猷;余攀;項藎儀;劉一萱;蔣園園
• 申請（專利權）人: 武漢普賽特膜技術循環利用有限公司
• 主分類號: A23J1/04
• 分類號: A23J1/04;A23J3/34;A23J3/32;A23J3/04
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1.一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法，其特征在于通過以下步驟實現：

（1）制醪：取木薯干和玉米磨碎成可過40目篩的細粉，取海魚制成魚糜，加足量的水配成混合液，此時混合液中木薯干的濃度為3～6%，玉米的濃度為1～2%，海魚糜的濃度為10～15%，將此混合液經膠體磨后，于75～85℃保溫攪拌30min，完成糊化，然后分別加入淀粉酶和糖化酶，于55～65℃保溫攪拌30min，完成糖化，再將此糖化后的醪液用硫酸調pH至4.0～4.5，經超高溫滅菌，在無菌條件下冷卻至30℃保存待用；

（2）接種：取一定量的活性干酵母，與6～8倍的水和6～8倍待用的醪液混合后，30℃保溫30min，然后加入已冷卻好的醪液，完成接種；

（3）發酵：開動攪拌器進行通風培養，培養過程中每隔2h開機攪拌通風一次，發酵過程分三階段，發酵液以糖度降低到0.1°Bx以下，酒精度達到10%以上為準；

（4）分離：將發酵液使用臥螺離心機分離出固體殘渣，此殘渣中包含酵母菌體、木瓜干和玉米的纖維殘渣、魚肉中的破碎骨骼，以及由乙醇沉淀出的糖類物質和大分子蛋白質，然后將分離得到的液體經兩相碟片式離心機分離得到乳化液和清液，此乳化液中包含玉米和魚肉中的脂肪及脂溶性成分，而清液中則富集著經酵母蛋白酶消化水解后得到分子量較小的海魚小分子蛋白；

（5）純化：將碟片離心機所得清液經100k～200kDal截留分子量的超濾膜過濾，所得濾出液再經100～200Dal截留分子量的納濾膜濃縮，所得濃縮液即為經純化后的海魚小分子蛋白液；

（6）聚合：再將納濾膜濃縮液中添加谷氨酰胺轉氨酶，于40℃條件下保溫攪拌4～10h，以完成小分子蛋白質的聚合，使其分子量擴大到2000～4000Dal；

（7）干燥：將經過酶聚合的納濾膜濃縮液使用噴霧干燥或冷凍干燥去除水分，得到干燥的海魚小分子蛋白質。

2.根據權利要求1所述的一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法，其特征在于：所述步驟（1）中加入的淀粉酶和糖化酶分別為木薯干與玉米總質量的0.1～0.5%和0.5～1%。

3.根據權利要求1所述的一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法，其特征在于：所述步驟（2）中活性干酵母的用量為木薯干和玉米總質量的0.1～0.2%。

4.根據權利要求1所述的一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法，其特征在于：所述步驟（3）中發酵過程的三個階段分別為：一階段于30℃培養8～10h，二階段于32~34℃培養10～12h，三階段于30～32℃培養30~35h。

5.根據權利要求1所述的一種生物法生產海魚小分子蛋白質的方法，其特征在于：所述步驟（6）中加入添加谷氨酰胺轉氨酶的量為納濾膜濃縮液的1～2%。