[發明專利]一種鐵皮石斛的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201710064181.8
• 申請日: 2017-02-04
• 公開（公告）號: CN108398492B
• 公開（公告）日: 2021-03-16
• 發明（設計）人: 趙田
• 申請（專利權）人: 北京藍標一成科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發明公開鐵皮石斛的質量檢測方法，包括：1)以ITS?26SE和ITS?17SE為引物，進行測序，以鑒定待測石斛藥材的品種；2)對樣本容量為n的樣本進行色譜檢測，獲取以化學小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作為參照成分的檢測數據；3)對樣本分別進行指紋圖譜檢測，獲取鐵皮石斛的全化學成分的指紋圖譜峰面積值；4)以色譜數據中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作為響應變量，將指紋圖譜中的其它成分的峰面積值作為自變量建立分析模型，通過Lasso方法篩選變量建立化學小分子成分的相關特征指紋圖譜模型。通過一代測序及特征指紋圖譜，精確地鑒別和控制鐵皮石斛藥材的質量。

技術領域

本發明屬于中藥成份檢測分析領域，具體涉及一種鐵皮石斛的質量檢測方法。

背景技術

鐵皮石斛(Dendrobium catenatum Lindley,Dendrobium officinale KimuraMigo)：又名黑節草。莖直立，少匍匐或斜立，肉質，圓柱形，長9cm～35cm，直徑0.2cm～0.4cm，不分枝，具多節，節間長1.3cm～1.7cm；葉基部下延為抱莖的鞘，邊緣和中肋常帶淡紫色，葉鞘常具紫斑，老時其上緣與莖松離而張開，并且與節留下一個環狀鐵青色的間隙。總狀花序常從落葉的老莖上部發出，具2朵～3朵花；花序柄長0.5cm～1.0cm，基部具2枚～3枚短鞘；花序軸回折狀彎曲，長2cm～4cm；花苞片干膜質，淺白色，卵形，長0.5cm～0.7cm，先端稍鈍；花梗和子房長2cm～2.5cm；萼片和花瓣黃綠色，近相似，長圓狀披針形，長約1.8cm，寬0.4cm～0.5cm，先端銳尖，具5條脈；側萼片基部較寬闊，寬約1cm；萼囊圓錐形，長約0.5cm，末端圓形；唇瓣白色，淺綠色或淺黃綠色，基部具一個綠色或黃色的胼胝體，卵狀披針形，比萼片稍短，中部反折，先端急尖，不裂或不明顯3裂，中部以下兩側具紫紅色條紋，邊緣多少波狀；唇瓣密布細乳突狀的毛，并且在中部以上具1個紫紅色斑塊，或2個分離的紫色斑塊；蕊柱黃綠色，長約0.3cm，先端兩側各具1個紫點；蕊柱足黃綠色帶紫紅色條紋，疏生毛；藥帽白色，長卵狀三角形，長約0.2cm～0.3cm，頂端近銳尖并且2裂。其莖入藥，屬補益藥中的補陰藥：益胃生津，滋陰清熱。

石斛一直被人們視為珍貴的中草藥，具有十分重要的滋補功效。在臨床上，石斛被用于治療多種疾病，具有增強免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌癥等藥理功效。由于人為長期無節制采挖及不合理利用石斛，其野生資源日趨減少，市場上出現了一些以假亂真、以次充好的現象。此外，由于石斛品種較多，其品種間的雜交使得其近緣的種存在性狀交叉現象，分類區別比較困難。因此，有必要建立石斛的特征指紋圖譜對石斛的藥材質量進行評價。

色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，作為一種全局分析的全景模式，反映的是樣品的整體情況。但在色譜指紋圖譜分析過程中，很多數據都是高維的，即數據包含很多屬性或特征，比如有關鐵皮石斛色譜指紋圖譜，就能更好地對鐵皮石斛進行描述，但在實際應用中對高維數據直接進行操作將會面臨“維數災難”的問題，“維數災難”會導致建模過程所需要的樣本數隨著維數升高而呈指數級增長。面對高維數據，常規的最小二乘方法不再適用，為了提高模型的可解釋性和預測的準確度，變量選擇變得很重要。如何高效地從眾多的變量中篩選出對因變量有重要作用的若干個變量，是在對指紋圖譜進行分析時亟需解決的問題。

目前國家藥典采用定量測定中藥材中某一活性成分或有效成分即小分子成分的含量的高低來評價其質量。但研究證明，中藥的療效是來自其多種“活性成分”之間的協同作用，甚至是被普遍公認的有效的“活性成分”與“非活性成分”之間的協同作用或“生克作用”才能達到中藥的療效，而不是某一活性成分單獨作用的結果。在中醫理論指導下的中藥，任何一種活性成分均不能全面反映中醫用藥所體現的整體療效。

發明內容

本發明提供了一種鐵皮石斛的質量檢測方法，通過一代測序鑒定石斛藥材的品種，利用Lasso方法篩選變量建立鐵皮石斛中的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜模型，通過一代測序和相關特征指紋圖譜模型準確評價鐵皮石斛的藥材的質量。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：