[發明專利]一種與奶山羊乳脂率性狀相關的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201710059164.5
• 申請日: 2017-01-24
• 公開（公告）號: CN106754909B
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 李和剛;程明;張婉瑩;楊培培;張寶珣;李培培;郝小靜;侯樂樂;包漢勛;劉開東;孟德坤;房志遠
• 申請（專利權）人: 青島市畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6888
• 代理公司: 青島中天匯智知識產權代理有限公司 37241
• 代理人: 萬桂斌

本發明屬于動物分子標記制備技術領域，具體涉及一種與奶山羊乳脂率性狀相關的分子標記的制備與應用。所述的分子標記由山羊SPARC基因克隆得到，它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示，在序列表SEQ ID NO.1所示的第142位堿基處有一個G/A突變，該突變導致Bgl Ⅱ?RFLP多態性。本發明還公開了獲得分子標記的制備方法及多態性檢測方法的應用，為奶山羊的標記輔助選育提供了一個新的分子標記。

技術領域

本發明屬于動物分子標記制備技術領域，具體涉及一種與奶山羊乳脂率性狀相關的分子標記的制備與應用。

背景技術

我國是奶山羊飼養量較多、分布范圍較廣的國家，奶山羊養殖業在20世紀60-80年代曾經是我國奶業的主導產業，90年代以后受到飼養規模小、乳品工業迅速膨脹等因素的影響，奶山羊生產發展遲緩。近十多年來，隨著人民生活水平的不斷提高和膳食結構改善的需求，人們對山羊奶營養價值和安全性的認同度有所改變，尤其是機器擠奶解決了規模化飼養的瓶頸問題，促進了全國奶山羊產業的復興和發展。我國奶山羊品種是在二十世紀初由國外傳教士帶入的奶山羊品種與本地山羊雜交改良，又經過生態適應和系統選育而形成的，已經列入國家品種志或名錄的有雅安奶山羊、嶗山奶山羊、關中奶山羊和西農薩能奶山羊等。但由于飼養分散、規模較小等原因，我國奶山羊的遺傳改良主要采用常規的育種手段，其泌乳性能遺傳進展較為緩慢。

隨著分子生物學技術的快速發展，分子標記輔助育種已成為動物遺傳育種研究的熱點和必然趨勢。應用分子技術闡明奶山羊泌乳性狀的調控機制，結合泌乳性狀加強奶山羊的選育，必將大大加快奶山羊育種的進程。分子標記輔助育種技術的核心是尋找決定泌乳性狀的主效基因及其分子標記。近年來，國內外學者對奶山羊產奶性狀相關基因進行了一些研究，找到了一些功能基因和分子標記，但是有關乳脂率性狀的研究報道較少。

SPARC基因與細胞生長代謝相關。孫杰(2009)通過差異消減法鑒定到SPARC基因在西農薩能奶山羊泌乳初期和盛期乳腺組織之間存在差異表達，并通過實時熒光定量PCR進行了驗證(孫杰，奶山羊乳腺消減文庫構建及差異表達基因的研究，石河子大學2009年博士學位論文)，提示該基因可能在奶山羊泌乳過程中發揮重要的調控作用,可作為開發奶山羊分子育種標記的候選基因。因此進一步明確SPARC基因與奶山羊乳脂率性狀的相關性為奶山羊育種提供新的分子標記勢在必行。

發明內容

本發明克隆了與奶山羊乳脂率性狀相關的SPARC基因片段(該基因片段就是本發明制備的與奶山羊乳脂率性狀相關的分子標記)，并提供了與奶山羊乳脂率性狀相關的SPARC基因片段的制備方法，該基因片段是通過設計特異性的引物，利用PCR擴增得到包括一個突變位點的SPARC基因的片段，并且根據BglⅡ-RFLP方法得到的不同酶切圖譜確定不同的基因型。

本發明還提供了一種與奶山羊乳脂率性狀相關的SPARC基因片段在奶山羊分子標記輔助選育中的應用。

具體地，本發明采用以下技術方案：

一.發明人通過基因克隆方法得到了一種與奶山羊乳脂率性狀相關的SPARC基因片段(該基因片段就是本發明制備的與奶山羊乳脂率性狀相關的分子標記)，其核苷酸序列如下所示：

cga ggacaacaac ctcctgaccg agaagcagaa

gctgcgagta agggtctttt ctcgtcctgt ctcagggcac ttgctcgacc ctgagctggc

cctgacctcg ggccccaggc tggctgagat ccccagtccc attcccagRt ctaggccccc

aaatgtaagc ccacatccct gctccaacga gcacctctgt cccgggctct gggacacaga

ctcctccgtt cggcctttgg aggctcctag