[發(fā)明專利]一種利用生物柴油副產(chǎn)物粗甘油進(jìn)行高附加值轉(zhuǎn)化獲得SA的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710058466.0
• 申請日: 2017-01-23
• 公開（公告）號: CN106591398A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 袁麗霞;孫立潔;陳祥松;吳金勇;姚建銘;朱薇薇
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院合肥物質(zhì)科學(xué)研究院
• 主分類號: C12P19/26
• 分類號: C12P19/26;C12R1/19
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責(zé)任公司34101
• 代理人: 盧敏,何梅生

1.一種利用生物柴油副產(chǎn)物粗甘油進(jìn)行高附加值轉(zhuǎn)化獲得SA的方法，其特征在于，包括如下步驟：

a、副產(chǎn)物粗甘油的預(yù)處理：

將制備得到的生物柴油粗品靜止分層，上層為柴油、下層為副產(chǎn)物粗甘油；

首先將粗甘油與蒸餾水按體積比1:2～4混勻，以降低粗甘油的粘性；然后用酸調(diào)節(jié)pH至3～5，使粗甘油中的皂化物轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x脂肪酸，靜置分層，使游離脂肪酸從粗甘油中分離出來；再對粗甘油進(jìn)行40～80℃真空蒸發(fā)，除去易揮發(fā)性雜質(zhì)；最后再加入活性炭進(jìn)行吸附脫色并除雜；

b、發(fā)酵培養(yǎng)基的配置：

以預(yù)處理后的粗甘油作為碳源，加入含銨根離子的氮源，再加入餐廚廢水，使碳源和氮源的質(zhì)量比為1:1～3:1、甘油含量在10～30g/L；再加入IPTG，使IPTG的質(zhì)量濃度在1～3％；最后調(diào)pH至7.0、高溫滅菌，獲得發(fā)酵培養(yǎng)基；

c、種子液制備：首先將活化大腸桿菌基因工程菌接種到LB固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)6～12h；然后再接種到LB液體培養(yǎng)基上，繼續(xù)培養(yǎng)6～12h，得到二級種子液；

d、發(fā)酵：將二級種子液按照3％～15％的接種量接種到5L步驟b獲得的發(fā)酵培養(yǎng)基中，溶氧保持在20％以上，攪拌，維持發(fā)酵溫度為35～40℃，進(jìn)行連續(xù)發(fā)酵；

e、待底料耗完后，開始補(bǔ)料，保持pH在6.0～7.0，繼續(xù)培養(yǎng)60～80h，發(fā)酵結(jié)束，得產(chǎn)物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的氮源為氨水或硫酸銨。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟b中所述的餐廚廢水含有鈉鹽和鉀鹽，在加入IPTG之前，先調(diào)整鉀鹽含量在3～4g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟c中所述的大腸桿菌基因工程菌為專利ZL 201310600843.0中構(gòu)建的大腸桿菌工程菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟e中所述的補(bǔ)料是補(bǔ)入碳源和氮源，所述的碳源為預(yù)處理后的粗甘油，所述的氮源為氨水或硫酸銨；碳源的補(bǔ)料速度在300～500g/L.h；在補(bǔ)入碳源的同時補(bǔ)入氮源至pH在6.0～7.0。