[發明專利]一個kinase基因LeRLK1-V及其表達載體和應用

有效

• 申請號: 201710056951.4
• 申請日: 2017-01-22
• 公開（公告）號: CN108342401B
• 公開（公告）日: 2020-12-29
• 發明（設計）人: 曹愛忠;胡平;劉佳倩;邢莉萍;張瑞奇;張守忠;陳佩度
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N9/12;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

本發明屬于基因工程領域，公開了一個kinase基因LeRLK1?V及其表達載體和應用。LeRLK1?V的cDNA序列為SEQ ID NO.1及其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO.2。該基因來自小麥?簇毛麥易位系6VS/6AL南農9918的6VS染色體臂上。LeRLK1?V在抗白粉病小麥品種南農9918中受白粉菌誘導表達增強。通過瞬間表達將該基因轉化感病小麥品種揚麥158，結果表明LeRLK1?V的過量表達可以降低揚麥158的吸器指數。因此，LeRLK1?V可望用于基因工程育種，將其導入易感白粉病小麥品種中，有望提高小麥的白粉病抗性。

技術領域

本發明屬于基因工程領域，公開了一個kinase基因LeRLK1-V及其表達載體和應用。

背景技術

小麥(Triticum aestivum)的整個生育期受到多種病蟲的危害，其中由小麥白粉病菌(Blurmeria graminis f.sp.tritici，Bgt)侵染引起的小麥白粉病是小麥最嚴重的真菌病害之一。由于小麥白粉病菌生理小種多、毒力變異快，一旦產生新的毒性小種或小種種群發生變化，會導致小麥白粉病的大爆發，給農業生產帶來災難性后果。廣譜、持久抗病基因的發掘和利用對白粉病防治具有重要意義。

簇毛麥(Haynaldia villosa，2n＝2x＝14，VV)攜帶的抗白粉病基因Pm21對小麥白粉病具有廣譜、高抗特性，該基因定位于6V染色體短臂上。南京農業大學細胞遺傳研究所利用四倍體圓錐小麥與二倍體簇毛麥雜交，再與普通小麥回交多代后，選育出了普通小麥-簇毛麥6VS/6AL易位系，將含有Pm21基因的6VS導入普通小麥。普通小麥-簇毛麥6VS/6AL易位系自1994年進入國內育種利用以來，在白粉病常發區進行了多年種植，對白粉病表現出了廣譜、高抗特性，以之為親本已經選育出一批高抗白粉病的小麥新品種，南農9918即選育出的其中一個品種，Pm21在育種中得到廣泛應用。在6VS上篩選和鑒定具有白粉病抗性功能的基因，對分析Pm21介導的廣譜抗性機理和克隆其候選基因對于利用基因工程手段培育具有白粉病廣譜抗性的小麥品種具有重要意義。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述缺陷，提供一個kinase基因LeRLK1-V及其表達載體和應用。

本發明的目的可通過如下技術方案實現：

LeRLK1-V基因來自普通小麥(Triticum asetivum L.)南農9918，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1。

該LeRLK1-V基因的蛋白質為LeRLK1-V，其氨基酸序列為SEQ ID NO.2。

含有所述的LeRLK1-V的重組表達載體pBI220:LeRLK1-V。

所述的LeRLK1-V基因的重組表達載體優選以pBI220為出發載體，將LeRLK1-V基因插入pBI220的BamHI和StuI酶切位點間所得。

所述的LeRLK1-V基因在構建抗白粉病小麥品種中的應用。

所述的LeRLK1-V基因的表達載體在構建抗白粉病小麥品種中的應用。

有益效果：

本發明從小麥-簇毛麥易位系6VS/6AL南農9918的6VS染色體臂上克隆獲得小麥中克隆得到了一個kinase基因LeRLK1-V及其所編碼的蛋白質LeRLK1-V，將其插入表達載體pBI220，得到的該基因的過量表達載體導入感病小麥品種中，可以提高感白粉病小麥品種對白粉病的抗性。LeRLK1-V的超量表達載體用于基因工程育種，將其導入易感白粉病小麥品種中，能夠獲得具備白粉病抗性的小麥種質。

附圖說明

圖1LeRLK1-V在抗白粉病南農9918中受白粉菌誘導表達

圖2pBI220:LeRLK1-V超量表達載體圖譜