[發(fā)明專利]青蒿素及其衍生物在制備防治豬繁殖與呼吸綜合征藥物中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710055389.3
• 申請(qǐng)日: 2017-01-17
• 公開（公告）號(hào): CN108309973A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳建新;田鴿;李志萍;劉雅紅;鄧銜柏;邱電;吳倩倩;張明昕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué);江西鵬創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61K31/366
• 分類號(hào): A61K31/366;A61K31/357;A61P31/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了青蒿素及其衍生物在制備防治豬繁殖與呼吸綜合征藥物中的應(yīng)用。藥理試驗(yàn)表明，青蒿素及其衍生物對(duì)感染豬繁殖與呼吸綜合征病毒的細(xì)胞具有顯著的保護(hù)作用，具有顯著的抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒活性。青蒿素及其衍生物可以作為有效成分制備防治豬繁殖與呼吸綜合征的新藥，其應(yīng)用前景廣闊。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及獸醫(yī)藥物領(lǐng)域，具體涉及用于制備防治豬繁殖與呼吸綜合征的藥物。

背景技術(shù)

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)俗稱“豬藍(lán)耳病”，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive andrespiratory syndrome virus，PRRSV)引起的一種在豬群中發(fā)生的新災(zāi)難性疾病，其臨床表現(xiàn)為母豬嚴(yán)重的繁殖障礙，斷奶豬普遍發(fā)生肺炎、生長遲緩以及死亡率增加，是一種高度傳染性疾病。PRRSV屬套式病毒目，動(dòng)脈炎病毒科的單股RNA病毒，易發(fā)生基因重組，毒株交叉保護(hù)性低。其毒株分為歐洲株和美洲株，我國廣泛流行的藍(lán)耳病是美洲株變異引起的。該病既能垂直傳染又能水平傳播，能引起妊娠母豬發(fā)熱、厭食、流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎和弱仔，以及誘發(fā)仔豬和育成豬呼吸系統(tǒng)的多種疾病。

上世紀(jì)80年代末，PRRSV在美國首次被發(fā)現(xiàn)，之后迅速傳播至全球大多數(shù)國家和地區(qū)，在全球呈地方性流行。我國1996年從豬流產(chǎn)胎兒中分離到了PRRS病原體；2006年，我國爆發(fā)了以仔豬高死亡率為特征的高致病性藍(lán)耳病，使我國養(yǎng)豬業(yè)蒙受巨大損失，被列為我國一類動(dòng)物疫病，并且疫苗防治效果并不理想。目前，高致病性藍(lán)耳病的防控形勢十分嚴(yán)重，該病毒易發(fā)生重組、免疫逃避逃逸等問題，容易激發(fā)繼發(fā)豬瘟病毒、豬圓環(huán)病毒、豬流感病毒等感染，該病全球尚沒有有效的控制方法，疫苗免疫是其主要的預(yù)防措施。但臨床上使用PRRS疫苗主要存在的問題是：第一，疫苗產(chǎn)生免疫反應(yīng)需要較長時(shí)間；其次，PRRSV疫苗并不具備完全的保護(hù)力，尤其是滅活疫苗不能激發(fā)細(xì)胞免疫；第三，PRRSV弱毒疫苗可以在免疫豬體組織中存在幾周時(shí)間，并且從注苗豬向易感豬傳播。近些年來，中藥制劑的抗病毒作用已越來越受到人們的重視。

青蒿素是從黃花蒿(Artemisia annua L.)葉中提取得到的一種無色針狀晶體，屬倍半萜內(nèi)酯化合物，其衍生物主要有雙氫青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚和蒿乙醚，分子結(jié)構(gòu)如下所示：

青蒿素及其衍生物在臨床上主要用于瘧疾的治療，也有報(bào)道其他用途，如抗炎、抗腫瘤、抗菌等藥理活性。公開號(hào)為CN102755316A的專利文件公開了青蒿素及其衍生物在制備治療丙型肝炎病毒藥物中的應(yīng)用，公開號(hào)為CN1711031A的專利文件公開了青蒿素、青蒿素類似物和一些蒿的粗提取物在治療黃病毒科病毒(包括丙肝病毒、牛病毒性腹瀉病毒和豬瘟病毒)引起的感染中的應(yīng)用。目前對(duì)于運(yùn)用青蒿素及其衍生物抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒的作用未見報(bào)道，也未見公開的相關(guān)專利。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供青蒿素及其衍生物在制備抗PRRSV藥物上的應(yīng)用；本發(fā)明的另一目的是提供青蒿素及其衍生物在制備防治PRRS藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的具體實(shí)驗(yàn)技術(shù)如下：

首先運(yùn)用MTT法測定青蒿素及其衍生物對(duì)猴胚胎腎上皮細(xì)胞(Marc-145)和豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)的毒性，確定安全濃度。然后通過建立PRRSV感染細(xì)胞模型，評(píng)價(jià)青蒿素及其衍生物對(duì)感染PRRSV的Marc-145細(xì)胞和PAM細(xì)胞的保護(hù)效果。評(píng)價(jià)手段主要為間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR試驗(yàn)(Real-time PCR)以及蛋白免疫印跡試驗(yàn)(Westernblot)等。

本發(fā)明通過體外細(xì)胞試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)青蒿素及其衍生物具有明顯的抑制豬繁殖與呼吸綜合征病毒復(fù)制的作用，為通過藥物防治豬繁殖與呼吸綜合征提供了有力支持。