[發明專利]一種制備鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物的方法

有效

• 申請號: 201710039609.3
• 申請日: 2017-01-19
• 公開（公告）號: CN106749303B
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 吳世華;張利紅
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04;C07D311/36
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 萬尾甜;韓介梅

八角蓮是鬼臼毒素類抗癌藥物的重要資源。除鬼臼毒素類化合物外，黃酮和雙黃酮類化合物也是八角蓮藥用資源中的重要抗氧化和抗癌物質。但如何高純度地制備和純化這些物質，仍是一種重要的挑戰。本發明提供一種新的低成本的環境友好的高產率的制備高純度鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物的方法，包括溶劑提取和粗分等步驟，其特征在于所用分配體系中含有用來調節分配系數的糖。該方法經濟實用，便于大規模應用。并且由于糖具甜味和無毒，因此該方法不僅可以得到高純度的臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物單體，而且可以不經除糖得到這些單體的糖制劑。

技術領域

本發明涉及天然藥物的制備方法，具體的說是涉及黃酮類化合物(英文名Flavones)和鬼臼毒素類化合物(英文名Podophyl lotoxins)的分離制備方法。

背景技術

八角蓮是鬼臼毒素類抗癌藥物的重要資源。除鬼臼毒素類化合物外，黃酮和雙黃酮類化合物也是八角蓮藥用資源中的重要抗氧化和抗癌物質。但如何高純度地制備和純化這些物質，仍是一種重要的挑戰。逆流色譜是一種重要的方法，但如何選擇合適的溶劑體系仍是一個耗時的工作。

發明內容

本發明的目的是針對當前鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物分離制備中的困難提供一種制備鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物的方法，該方法成本低、環境友好且產率高、產物純度高。

本發明的制備鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物的方法，包括溶劑提取、粗分和逆流色譜分離步驟，所述的逆流色譜分離步驟中采用含有糖溶液的兩相溶劑作為逆流色譜溶劑，其中所述的糖用于調節分配系數K。

所述的糖是蔗糖、葡萄糖、果糖、麥芽糖、半乳糖、山梨糖、甘露糖、鼠李糖、木糖中的一種或多種組合。

所述的糖溶液為糖的水溶液，質量分數是5-30％。在所述的兩相分配體系中糖濃度可以是恒定的，也可以是梯度變化的；糖的梯度變化可以是線性梯度的，也可以是臺階式梯度。

所述的含有糖溶液的兩相溶劑為正己烷－乙酸乙酯－甲醇－糖的水溶液。

所述的含有糖溶液的兩相溶劑為正己烷－乙酸乙酯－乙醇－糖的水溶液。

一種制備鬼臼毒素和八角蓮雙黃酮及其類似物的方法，具體包括如下步驟：

(1)將八角蓮提取液進行柱色譜吸附和富集，然后用石油醚和乙酸乙酯體積比2:1進行洗脫，除去大極性雜質，收集洗脫液，得到八角蓮粗品；

(2)將糖溶解到水中配制形成糖溶液；

(3)將(1)中所得到的八角蓮粗品用正己烷、乙酸乙酯、甲醇/乙醇、糖溶液四元形成的兩相體系進行逆流色譜分離，得到含糖的黃酮類化合物和鬼臼類化合物純品；

(4)除去逆流色譜餾分—黃酮類化合物和鬼臼類化合物中的糖類，獲得產物。

上述技術方案中，所述的步驟2)中糖溶液質量分數為5％-30％。

步驟3)中所述的兩相體系中正己烷、乙酸乙酯、甲醇/乙醇、糖溶液四元的體積比為：4:6:4:6或4.5:5.5:4.5:5.5或5:5:5:5。

步驟(4)中脫糖的過程中，極性小的部分可以直接用乙酸乙酯干萃取，極性大的部分依次用水和甲醇分別洗脫反相C18分離柱上的化合物。

本發明的有益效果在于：

(1)糖是一種甜的、短鏈、可溶性的碳水化合物。作為添加劑，和鹽析制備化合物的策略相比，糖析制備的策略更綠色更環保，不會產生鹽腐蝕等并發癥。

(2)本發明中添加糖到正己烷、乙酸乙酯、甲醇/乙醇、水的兩相體系，可以改變溶劑以及化合物在兩相體系中的分配，從而可以快速有效地找到合適的溶劑體系。