[發明專利]一種液液微萃取合相色譜串聯質譜法檢測卷煙主流煙氣中9種芳香胺的方法

有效

• 申請號: 201710012585.2
• 申請日: 2017-01-09
• 公開（公告）號: CN106770783B
• 公開（公告）日: 2019-01-29
• 發明（設計）人: 鄧惠敏;楊飛;王穎;李中皓;邊照陽;范子彥;劉珊珊;衡英英;唐綱嶺
• 申請（專利權）人: 國家煙草質量監督檢驗中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 鄭州中民專利代理有限公司 41110
• 代理人: 姜振東

1.一種液液微萃取合相色譜串聯質譜法檢測卷煙主流煙氣中9種芳香胺的方法，所述9種芳香胺具體為：1-萘胺、2-萘胺、3-氨基聯苯、4-氨基聯苯、鄰甲氧基苯胺、2,6-二甲基苯胺、鄰甲苯胺、間甲苯胺、對甲苯胺，其特征在于：首先通過劍橋濾片捕集主流煙氣中的釋放的芳香胺，加入內標，以鹽酸水溶液對抽吸得到的劍橋濾片進行振蕩提取，加入氫氧化鈉水溶液將pH調節至12~13，加入一定量的萃取溶劑甲苯、鹽析劑氯化鈉進行震搖，離心后取出上層甲苯層，以合相色譜串聯質譜法UPC²-MS/MS對其中的芳香胺含量進行分析，并通過內標法進行定量；具體步驟如下：

（1）樣品前處理：

首先在加拿大深度抽吸模式下，采用轉盤式吸煙機對10支參比卷煙樣品進行抽吸測試，將抽吸得到的劍橋濾片放入到100 mL塑料瓶中，向瓶中加入60 mL 5% 鹽酸水溶液和250μL濃度為4.0 mg/L的混合內標溶液，將塑料瓶置于振蕩器上，以1000 r/min的速率振蕩提取30 min；向瓶中加入4.0 mol/L的氫氧化鈉水溶液以調節pH至12~13，加入萃取溶劑甲苯2 mL, 加入鹽析劑氯化鈉2 g，于渦旋混合儀上以2000 r/min振蕩2 min，然后以10000r/min離心2 min，取出上層甲苯層，加入至2 mL包括50 mg N-丙基乙二胺，50 mg C18，7.5mg 石墨化炭黑，150 mg 無水硫酸鎂的分散固相萃取凈化管中，于渦旋混合儀上以2000 r/min振蕩2 min，然后以10000 r/min離心2 min，即為樣品待測液；

（2）標準工作溶液配制：配制包括9種芳香胺和6種氘代內標的單標儲備液的配制、9種芳香胺和6種氘代內標的混標儲備液的配制以及系列標準工作溶液的配制；

（3）UPC²-MS/MS測定：

吸取配制好的系列標準工作溶液注入UPC²-MS/MS，以標準系列峰面積與內標峰面積之比對其質量建立線性回歸方程，對樣品待測液進行測定，測得各目標芳香胺的峰面積與內標的峰面積之比，代入線性回歸方程，分別得到樣品中9種芳香胺的含量；

UPC²-MS/MS分析條件

色譜條件：色譜柱選用HSS C18色譜柱，1.7 mm；柱溫：60℃；進樣量：2 mL；助溶劑：甲醇；流速：2 mL/min；補償溶劑：0.1%甲酸的甲醇；流速：0.2 mL/min；洗脫梯度如下表所示：

表1. 洗脫梯度

時間（min）	2（%）]]>	甲醇（%）
0	99	1
0.5	99	1
2.5	96	4
3.2	97	3
3.5	70	30
5	99	1

質譜條件：離子源：電噴霧電離源（ESI），溫度：150℃；毛細管電壓：3.0 kV；去溶劑氣溫度：300℃；去溶劑氣流速：800 L/h；反吹氣流速：50 L/h；多反應監測模式（MRM）。