[發(fā)明專(zhuān)利]一種單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710008366.7
• 申請(qǐng)日: 2017-01-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106680498B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳立國(guó);鄒偉權(quán);張亞麗;李慶祥;母潤(rùn)紅;王濤;蘇焱
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣州華弘生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/569
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 廣州勝沃園專(zhuān)利代理有限公司44416
• 代理人: 張帥

1.一種單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒，所述試劑盒由試劑條和塑料卡組裝而成，所述試劑條包括底板，所述底板上粘貼有帶有檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)的反應(yīng)膜，所述反應(yīng)膜靠近檢測(cè)線(xiàn)的一端依次疊加粘貼有膠體金墊、樣品墊，所述反應(yīng)膜靠近質(zhì)控線(xiàn)的一端疊加粘貼有吸收墊，所述反應(yīng)膜上有兩條檢測(cè)線(xiàn)，分別包被了單純皰疹病毒I型和II型多克隆抗體，所述反應(yīng)膜上質(zhì)控線(xiàn)包被了羊抗鼠IgG抗體，所述膠體金墊上包被了膠體金標(biāo)記的鼠源抗單純皰疹I(lǐng)型和II型單克隆抗體，其特征在于：

所述反應(yīng)膜由以下方法制得：用緩沖液將單純皰疹病毒I型和II型多克隆抗體分別稀釋至包被濃度為0.8~1.2mg/mL，將羊抗鼠IgG抗體稀釋至包被濃度為1.5~1.8mg/mL，在反應(yīng)膜上分別劃線(xiàn)單純皰疹病毒I型、II型多克隆抗體檢測(cè)線(xiàn)和羊抗鼠IgG抗體質(zhì)控線(xiàn)，劃線(xiàn)后將反應(yīng)膜置于干燥間，溫度20~25℃，濕度小于30%，干燥4~5小時(shí)；

所述膠體金墊由以下方法制得：取100mL 0.01%氯金酸與2.0~3.0mL 1%檸檬酸三鈉充分混勻后，調(diào)節(jié)pH值為7.5~8.5，加入椰油酰胺丙基甜菜堿，然后置于微波爐中加熱攪拌15~20min，待其冷卻后用雙蒸水補(bǔ)至原體積，制得膠體金溶液，取100mL膠體金溶液放在燒杯內(nèi)，用0.2M K₂CO₃調(diào)至pH8.0，按100mL膠體金溶液加入1.5mg鼠源抗單純皰疹I(lǐng)型單克隆抗體和1.5mg鼠源抗單純皰疹I(lǐng)I型單克隆抗體，再緩慢添加0.2M K₂CO₃將膠體金溶液調(diào)至pH9.5，添加K₂CO₃的時(shí)間為5分鐘，然后室溫?cái)嚢?0分鐘，加入終濃度為10mg/mL牛血清白蛋白，1mg/mL聚乙烯吡咯烷酮封閉20~30min，12000r/m離心30min，棄上清，用緩沖液復(fù)溶至50mL，按1mL溶液鋪20cm²的比例均勻地鋪在玻璃纖維膜上，再置于干燥間，溫度20~25℃，濕度小于30%，干燥4~5小時(shí)；

所述椰油酰胺丙基甜菜堿的加入量為2~5g；

所述置于微波爐中加熱攪拌步驟的微波加熱的功率為600~700w。

2.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述緩沖液為0.1mol/L pH8.5磷酸鹽緩沖溶液。

3.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述膠體金溶液制備中的攪拌速度為60~80r/min。

4.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述反應(yīng)膜為硝酸纖維素膜。

5.如權(quán)利要求1所述單純皰疹病毒I型和II型抗原聯(lián)檢試劑盒，其特征在于，所述樣品墊為玻璃纖維膜。