[發明專利]一種用于抗生素檢測的磁控適配體傳感器制備方法

有效

• 申請號: 201710007605.7
• 申請日: 2017-01-05
• 公開（公告）號: CN106770173B
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 李歡歡;陳全勝;趙杰文;歐陽琴;郭志明;林顥;劉妍;孫浩;楊明秀
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種用于抗生素殘留檢測的MCNCs/PMAA磁控拉曼適配體傳感器制備方法。該方法為：以制備的具有高飽和磁化率及生物相容性的磁性納米微球MCNCs/PMAA螯合適配體作為捕獲探針，包埋對巰基苯胺的Au@SiO₂核殼納米顆粒作為增強基底螯合適配體短鏈互補DNA作為信號分子，利用適配體技術結合表面增強拉曼光譜技術構建傳感器實現抗生素殘留檢測研究。當抗生素存在時，影響適配體在檢測體系中的結構，與適配體發生特異性識別結合，從而引起不同濃度信號分子在不同濃度抗生素存在下的釋放，隨后對檢測體系進行磁力吸附，上清液中釋放的自由信號分子可對拉曼信號進行不同程度的放大，依據不同拉曼強度的標記物拉曼特征峰圖譜，實現抗生素殘留靈敏間接檢測的目的。

技術領域

本發明涉及一種用于抗生素殘留檢測的MCNCs/PMAA磁控拉曼適配體傳感器制備方法，具體涉及將傳感器技術、拉曼技術相結合，制備以MCNCs/PMAA磁性納米微球螯合核酸適配體為捕捉分子，包埋對巰基苯胺(標記物)的Au@SiO₂核殼納米顆粒作為增強基底螯合適配體短鏈互補DNA作為信號分子，實現典型抗生素殘留的快速、靈敏、有效檢測研究。

背景技術

隨著抗生素的廣泛使用，其殘留所帶來的一系列問題也接踵而至，調查表明，動物性食品中殘留抗生素是誘發兒童肥胖的一個重要因素，這就使得殘留抗生素檢測顯得尤為重要。常用的抗生素殘留分析方法目前主要有傳統的微生物檢驗技術、分子生物學技術、儀器分析技術和免疫學技術?，F有的這些分析方法雖各有優勢，但都存在一定的局限性，或者前處理步驟復雜、時間長，或者儀器設備龐大昂貴等。因此，鑒于申請人在食品安全因子檢測及拉曼光譜技術使用方面積累的良好的工作基礎，本發明擬制備一種快速、靈敏、有效的傳感器體系，結合拉曼光譜技術實現抗生素殘留的高效檢測，為開創食品安全因子檢測新途徑提供理論基礎。

目前，用MCNCs/PMAA磁性納米微球-適配體作為捕捉探針，cDNA-APS作為信號分子構建傳感器體系對抗生素殘留進行靈敏、有效檢測仍未見報道。本發明作為一種新興的抗生素殘留檢測方法，從一定程度上實現了影響人類食品安全因子檢測的新途徑開發。

發明內容

本發明的目的是提供了一種用于抗生素殘留檢測的MCNCs/PMAA磁控拉曼適配體傳感器制備方法，其靈敏度高、可靠性強、檢測速度快，實現對典型抗生素殘留檢測的目的，適用于食品安全、環境監測等技術領域。

為了實現上述目的，本發明采用的技術方案：制備適配體傳感器，當抗生素存在時，影響適配體在檢測體系中的結構，與適配體發生特異性結合，從而引起不同濃度信號分子在不同濃度抗生素存在下的釋放，隨后對檢測體系進行磁力吸附，上清液中釋放的自由信號分子對拉曼信號進行不同程度的放大，依據不同拉曼強度的標記物拉曼特征峰圖譜，實現對痕量抗生素殘留靈敏間接檢測的目的；該方法適用于食品安全、環境監測等技術領域。

上述的一種用于抗生素殘留檢測的MCNCs/PMAA磁控拉曼適配體傳感器制備方法，所述的MCNCs/PMAA納米微球，由蒸餾沉淀聚合反應制備而成，具有高飽和磁化強度71.5emu/g及優良的生物相容性，有利于快速、較易的生物反應及磁性分離。此外，該納米微球具有自由的羧基表面，使其盡可能多的與核酸適配體發生縮合反應生成捕捉探針。

上述的一種用于抗生素殘留檢測的MCNCs/PMAA磁控拉曼適配體傳感器制備方法，所述的增強基底為包埋對巰基苯胺(PATP)的金包二氧化硅核殼狀納米復合材料，與常用的增強基底相比，標記物對巰基苯胺PATP固定在金核及二氧化硅殼之間成功避免外界環境的干擾，提高了獲取拉曼信號的穩定性及重復性。