[發(fā)明專利]利用蔬菜產(chǎn)區(qū)種養(yǎng)廢棄物生產(chǎn)有機肥的菌劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710002415.6
• 申請日: 2017-01-03
• 公開（公告）號: CN106635915B
• 公開（公告）日: 2020-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李耀東;任瑞;臧榮鑫;徐紅偉;楊具田;楊妍梅
• 申請（專利權(quán)）人: 西北民族大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C05F11/08;C12R1/38;C12R1/065;C12R1/645
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 11732
• 代理人: 王燦

1.利用蔬菜產(chǎn)區(qū)種養(yǎng)廢棄物生產(chǎn)有機肥的菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按10kg~20kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A；

⑵在所述溶液A中加入混合菌液，混合均勻后得到混合液；然后按每1L混合液添加無機鹽1份，即得到溶液B；所述混合菌液與所述溶液A的比例為0.5kg~1kg：10kg~20kg；所述混合菌液是按下述方法制得：

①制備沼澤紅假單胞菌純培養(yǎng)菌種：按1g菌種沼澤紅假單胞菌用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液A接種于胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)6~24h，即得；所述胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養(yǎng)基是指胰蛋白胨15.0g、大豆胨5.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

②制備褐球固氮菌純培養(yǎng)菌種：按1g菌種褐球固氮菌用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液B接種于固氮斜面培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)6~24h，即得；所述固氮培養(yǎng)基是指酵母提取物0.5g、甘露醇20.0g、磷酸二氫鉀0.2g、磷酸氫二鉀0.8g、硫酸鎂0.2g，硫酸鈣0.1g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

③制備放線菌純培養(yǎng)菌種：按1g菌種放線菌用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液C接種于酵母麥芽汁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)24~48h，即得；所述酵母麥芽汁瓊脂斜面培養(yǎng)基是指葡萄糖4.0g、酵母膏4.0g、麥芽提取物10.0g、碳酸鈣2.0g、瓊脂12.0g溶于1L蒸餾水而得；

④制備白腐菌純培養(yǎng)菌種：按1g菌種白腐菌用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液D接種于馬鈴薯瓊脂斜面培養(yǎng)基上，37℃條件下培養(yǎng)24~48h，即得；所述馬鈴薯瓊脂斜面培養(yǎng)基是指馬鈴薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g、瓊脂15.0g混合而成；

⑤在透明容器中裝1/2~2/3的溶液A，分別按所述溶液A體積的3~8%的接種量接種所述沼澤紅假單胞菌純培養(yǎng)菌種、褐球固氮菌純培養(yǎng)菌種、放線菌純培養(yǎng)菌種、白腐菌純培養(yǎng)菌種，然后分別采用透氣膜封口，并置于28℃~36℃、轉(zhuǎn)速為180~220r/min的搖床上培養(yǎng)2~6天，當菌量達到200億cfu/ml時，分別得到四種菌種擴增純培養(yǎng)液；

⑥將所述四種菌種擴增純培養(yǎng)液按1：1：1：1的重量比均勻混合后即得；

⑶在所述溶液B中加入玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料；所述溶液B、玉米粉的比例為1kg~3kg：7kg~9kg；

⑷將所述原料裝入透明容器中，用透氣膜封口，在光照充分條件下于28℃~36℃發(fā)酵1~3天，且每6~12h攪拌一次，當混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下經(jīng)干燥、粉碎、裝袋，即得有機肥菌劑。

2.如權(quán)利要求1所述的利用蔬菜產(chǎn)區(qū)種養(yǎng)廢棄物生產(chǎn)有機肥的菌劑的制備方法，其特征在于：所述步驟⑴中牛奶是指經(jīng)過巴氏滅菌后的脫脂牛奶。

3.如權(quán)利要求1所述的利用蔬菜產(chǎn)區(qū)種養(yǎng)廢棄物生產(chǎn)有機肥的菌劑的制備方法，其特征在于：所述步驟⑵中無機鹽1份是由檸檬酸二鈉2.0g、磷酸二氫鉀2.0g、磷酸氫二鉀2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g組成。

4.如權(quán)利要求1所述的利用蔬菜產(chǎn)區(qū)種養(yǎng)廢棄物生產(chǎn)有機肥的菌劑的制備方法，其特征在于：所述步驟⑶中玉米粉細度為80~100目。