[發明專利]表達γ?δT細胞受體(TCR)和嵌合抗原受體(CAR)的T細胞

在審

• 申請號: 201680024237.0
• 申請日: 2016-04-29
• 公開（公告）號: CN107771215A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: J·安德森;喬納森·費希爾;M·普萊;肯思·古斯塔夫森
• 申請（專利權）人: UCL商業有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C07K19/00;A61K35/17;A61P35/00;A61P31/00;A61P31/12
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司11262
• 代理人: 鄭霞

1.一種T細胞，所述T細胞表達γ-δT細胞受體(TCR)和嵌合抗原受體(CAR)，其中所述CAR包含；

(i)抗原結合結構域；

(ii)跨膜結構域；和

(iii)共刺激性細胞內信號傳導結構域；

其中所述細胞內信號傳導結構域在抗原與所述抗原結合結構域結合之后向所述T細胞提供共刺激性信號。

2.根據權利要求1所述的細胞，其中所述抗原結合結構域能夠與腫瘤相關抗原(TAA)結合。

3.根據權利要求1所述的細胞，其中所述抗原結合結構域能夠與GD2、CD33、CD19或EGFR結合。

4.根據任一項前述權利要求所述的細胞，其中所述跨膜結構域包含CD8莖或CD28跨膜結構域。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的細胞，其中所述細胞內信號傳導結構域包括DAP10、CD28、CD27、41BB、OX40、CD30、IL2-R、IL7-R、IL21-R、NKp30、NKp44或DNAM-1(CD226)信號傳導結構域。

6.根據權利要求1至4中任一項所述的細胞，其中所述細胞內信號傳導結構域包含所述DAP10信號傳導結構域。

7.根據任一項前述權利要求所述的細胞，其中第一抗原與γ-δTCR的結合導致信號1產生并且第二抗原與CAR的抗原結合結構域的結合導致信號2產生。

8.根據任一項前述權利要求所述的細胞，其中所述CAR還包含在所述抗原結合結構域和所述跨膜結構域之間的間隔區結構域，例如CD8莖或Fc區域。

9.根據任一項前述權利要求所述的細胞，其中所述γ-δTCR能夠結合磷酸抗原；主要組織相容性復合物I類相關鏈A(MICA)；主要組織相容性復合物I類相關鏈B(MICB)；NKG2D配體1-6(ULBP 1-6)；CD1c；CD1d；內皮細胞蛋白C受體(EPCR)；脂六肽；藻紅蛋白或組氨酰基-tRNA-合酶。

10.一種CAR，所述CAR包含：

(i)抗原結合結構域；

(ii)跨膜結構域；和

(iii)細胞內信號傳導結構域；

其中所述細胞內信號傳導結構域包含共刺激性細胞內信號傳導結構域，但不包含CD3細胞內結構域。

11.根據權利要求10所述的CAR，其中所述共刺激性細胞內信號傳導結構域選自DAP10、CD28、CD27、41BB、OX40、CD30、IL2-R、IL7-R、IL21-R、NKp30、NKp44或DNAM-1(CD226)信號傳導結構域。

12.一種CAR，所述CAR包含：

(i)抗原結合結構域；

(ii)跨膜結構域；和

(iii)細胞內信號傳導結構域；

其中所述細胞內信號傳導結構域包含DAP10信號傳導結構域。

13.根據權利要求12所述的CAR，其中所述細胞內信號傳導結構域不包含CD3細胞內結構域。

14.根據權利要求10至13中任一項所述的CAR，所述CAR為如在權利要求2至9中任一項定義的CAR。

15.一種核酸序列，所述核酸序列編碼如在任一項前述權利要求中定義的CAR。

16.一種載體，所述載體包含如在權利要求15中定義的核酸序列。

17.根據權利要求16所述的載體，所述載體為逆轉錄病毒載體、慢病毒載體或轉座子。

18.一種用于制備根據權利要求1至9中任一項所述的細胞的方法，所述方法包括以下步驟：將根據權利要求15所述的核酸序列或根據權利要求16或17所述的載體引入到細胞中。

19.根據權利要求18所述的方法，其中所述細胞用γδT細胞刺激劑刺激。

20.根據權利要求19所述的方法，其中所述γ-δT細胞刺激劑選自異戊烯焦磷酸(IPP)；IPP類似物；和法尼基焦磷酸合酶(FPPS)抑制劑。

21.根據權利要求19或20所述的方法，其中所述細胞來自從受試者分離的樣品。