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[實用新型]一種馬鈴薯病毒快速檢測試紙條有效

專利信息
申請號: 201621330258.9 申請日: 2016-12-06
公開(公告)號: CN206208905U 公開(公告)日: 2017-05-31
發明(設計)人: 劉衛平;李志新;張微;張瑩瑩;張新宇 申請(專利權)人: 黑龍江省農業科學院克山分院
主分類號: G01N33/569 分類號: G01N33/569;G01N33/558
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 161005 黑龍江省*** 國省代碼: 黑龍江;23
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 馬鈴薯 病毒 快速 檢測 試紙
【說明書】:

技術領域

本實用新型涉及利用免疫層析技術檢測植物病毒技術領域,具體涉及一種馬鈴薯病毒快速檢測試紙條。

背景技術

馬鈴薯是我國應用價值較高的經濟作物,己被列為我國7大作物之一,也是中國西部最重要的作物品種和主要的支柱型產業,發展勢頭良好,但目前我國馬鈴薯單產卻遠遠低于發達國家,馬鈴薯病毒是造成馬鈴薯產量低、質量差的主要原因。在中國的醫學檢驗如早孕、乙肝、寄生蟲、性病的檢驗和動物疫病的檢驗如禽病診斷、家畜疫病、小鼠肝炎病毒、豬旋毛蟲病、犬病病毒的診斷中有免疫層析試紙條的應用;在煙草、南瓜、萵苣、黃瓜花葉病毒、番茄環斑病毒、煙草環斑病毒、煙草脈帶病毒、柑橘潰瘍病菌、葫蘆科病毒、萵苣叢枝植原體的檢測中已有免疫層析試紙條的應用,但在馬鈴薯作物中還沒有田間快速檢測試紙條的應用。

常規的檢測馬鈴薯病毒的技術是雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗法,該方法需要專門的技術人員在專門的實驗室利用專門的設備進行實驗,操作過程繁瑣,實驗時間長:1.5-2天。不能現場取樣,現場出結果。目前生產上普遍采用馬鈴薯脫毒種薯來防治病毒病的危害,為確保馬鈴薯原原種、原種的脫毒質量,建立快速、準確、靈敏、高效的馬鈴薯病毒類病毒檢測技術是馬鈴薯種薯生產的關鍵技術環節。

通過檢索發現如下與本專利相關的專利公開文獻:

1、公開號為CN 103757138B的專利公開了一種云南馬鈴薯主栽品種麗薯6號、云薯401、宣薯2號病株中馬鈴薯Y病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒和馬鈴薯卷葉病毒4種病毒的檢測方法。本實用新型通過對云南馬鈴薯主栽品種麗薯6號、云薯401、宣薯2號病株中馬鈴薯Y病毒、馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒和馬鈴薯卷葉病毒4種特異性混合抗體誘捕病樣中病毒,不必提取樣品總RNA進行隨機引物逆轉錄和特異性病毒引物復合PCR反應。本方法將快速、特異的免疫沉淀與靈敏的復合RT-PCR結合,同時設置健康馬鈴薯隨機引物cDNA產物相應病毒PCR特異片段陽性質粒作為陰、陽性對照,從而快速、準確、靈敏的應用于檢測田間馬鈴薯植株樣品、抗病毒材料及田間環境疑似侵染源等方面。

2、公開號為CN 103757138B的專利涉及兩步法雙重RT一PCR同步檢測馬鈴薯Y病毒、馬鈴薯卷葉病毒,三重RT一PCR同步檢測馬鈴薯X病毒、馬鈴薯A病毒、馬鈴薯S病毒的方法及檢測試劑盒,是專門針對馬鈴薯產業影響較大的5種馬鈴薯病毒而建立的一種同步檢測2或3種病毒的快速方法,檢測時間僅用4h,且靈敏度高、特異性強、穩定可靠。該方法克服了現有對馬鈴薯病毒病依據癥狀學的常規診斷方法誤判率較高、血清學方法難以檢測休眠馬鈴薯中的病毒及病毒含量較少的韌皮部病毒—馬鈴薯卷葉病毒等缺點;該方法適用于馬鈴薯種苗、種薯多種病毒病的早期診斷,對馬鈴薯種薯質量監測和病毒病預防有著重要的作用。

通過對比,本專利申請與上述專利公開文獻存在本質的不同。

發明內容

本實用新型所要解決的技術問題是為了克服現有方法的不足,將馬鈴薯病毒快速檢測試紙條應用到馬鈴薯病毒檢測中,可實現對樣品中馬鈴薯病毒高特異性、高靈敏度、高準確性、高穩定性的檢測,快速檢測出馬鈴薯病毒病的發生情況,為馬鈴薯脫毒薯種薯級別的定級和馬鈴薯病毒的防控提供理論依據。

本實用新型的目的是通過以下技術方案實現的:

一種馬鈴薯病毒快速檢測試紙條,包括樣品墊1、金標墊 2、NC膜3、檢測線T線4、質控線C線5、吸水墊6和PVC底板7,所述PVC底板7的上部貼合有NC膜3,所述NC膜3上部兩端分別搭接有金標墊2和吸水墊6,所述金標墊2上部搭接有樣品墊1,所述檢測線T線4設置在靠近樣品墊1的NC膜3表面上,所述質控線C線5 設置在靠近吸水墊6的NC膜3上,所述檢測線T線4上包被有馬鈴薯病毒兔多克隆抗體,所述質控線C線5上包被有馬鈴薯病毒羊抗兔抗體,所述的金標墊2上結合有膠體金標記物。

而且,馬鈴薯病毒快速檢測試紙條外部還設有卡殼8,所述卡殼8上部表面與樣品墊1對應的位置上設有加樣孔9,所述卡殼8上部表面與所述NC膜3對應的位置上設有觀察槽10。

而且,所述NC膜3與金標墊 2搭接的長度為1-2mm,所述NC膜3與吸水墊6搭接的長度為2-3mm,所述金標墊 2與樣品墊1 搭接的長度為2-3mm。

而且,所述包被在質控線C線5上的馬鈴薯病毒羊抗兔抗體、包被在檢測線T線4上的馬鈴薯病毒兔多克隆抗體和包被結合在金標墊2上的馬鈴薯病毒膠體金標記物,可以是以下組合中的任意一種:

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