[發明專利]一種甲鈷胺片中有關物質新的測定方法

在審

• 申請號: 202110372679.7
• 申請日: 2021-04-07
• 公開（公告）號: CN113075331A
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 江永紅;丁月萍;劉蕾;劉紅;袁菊鳳
• 申請（專利權）人: 江蘇四環生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 蘇州國誠專利代理有限公司 32293
• 代理人: 王麗

本發明提供一種甲鈷胺中有關物質的測定方法，包括以下步驟：S1配制流動相：分別配制磷酸二氫鉀溶液、流動相A溶液和流動相B溶液；S2配制供試品溶液；S3配制對照品儲備溶液：分別配制羥鈷胺儲備溶液、維生素B12儲備溶液和甲鈷胺儲備溶液；S4配制對照品溶液；S5配制輔料溶液；S6配制靈敏度溶液；S7配制系統適用性溶液；S8色譜分析測定，根據液相色譜圖分析測定甲鈷胺片雜質含量；該方法專屬性更強，控制甲鈷胺片雜質限度，從而更有效地控制產品質量，為有關物質研究提供一定的基礎。

技術領域

本發明涉及藥物分析的技術領域，具體涉及一種甲鈷胺片中有關物質新的測定方法。

背景技術

甲鈷胺為內源性維生素B12，存在于血液、髓液中，與維生素B12相比，其對神經元的傳導有良好的改善作用，可通過甲基轉換反應促進核酸-蛋白-脂肪代謝，其作為甲硫氨酸合成酶的輔酶，可使高半胱氨酸轉化為甲硫氨酸，參與脫氧核苷合成胸腺嘧啶過程，促進核酸、蛋白合成，促進軸索內輸送和軸索再生及髓鞘的形成，防止軸突變性，修復被損害的神經組織。甲鈷胺片對周圍神經病變具有良好的治療作用，臨床價值較高。

由于本身化學性質的不穩定，甲鈷胺在強光下會降解生成羥鈷胺。羥鈷胺、甲鈷胺原料及甲鈷胺片制備及儲運過程中可能引入的其他雜質統稱為有關物質。目前，中國藥典中甲鈷胺片有關物質的檢測方法比較簡單，控制單雜≤1.0％、總雜≤3.0％，單雜限度較寬泛，對已知雜質羥鈷胺及維生素B12未做限度控制，因此產品質量控制存在一定隱患。

中國發明專利CN104122363A公開了一種甲鈷胺片有關物質的測定方法，包括如下步驟：①供試品的制備：②對照品的制備；③采用高效液相色譜測定有關物質的含量，色譜條件為：固定相是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜柱，流動相是由乙腈與磷酸鹽緩沖液組成的混合液；檢測波長為300～360nm，進樣量為20μl，柱溫為30℃，流速為0.5～1.5ml/min；梯度洗脫；④計算供試品中各雜質的含量，該方法雖然控制單雜含量≤1.0％，控制了總雜含量≤2.0％，但是單雜限度較寬泛，并且沒有對RRT約1.09含量、RRT約1.20含量和羥鈷胺含量做限度控制，因此還是對產品質量控制存在一定隱患。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供一種甲鈷胺片中有關物質的測定方法，該方法專屬性更強，控制甲鈷胺片雜質限度(羥鈷胺≤1.0％，雜質RRT約1.09≤0.5％，雜質RRT約1.20≤0.5％，單雜≤0.5％，總雜≤1％)，從而更有效地控制產品質量，為有關物質研究提供一定的基礎。

為了達到上述目的，本發明的技術方案如下：

一種甲鈷胺片中有關物質的測定方法，包括以下步驟：

S1配制流動相溶液：分別配制磷酸二氫鉀溶液、流動相A溶液和流動相B溶液；

S2配制供試品溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，取適量甲鈷胺片，加流動相A溶液超聲使甲鈷胺溶解，加流動相A溶液稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液作為供試品溶液；

S3配制對照品儲備溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，分別配制羥鈷胺儲備溶液、維生素B12儲備溶液和甲鈷胺儲備溶液；

S4配制對照品溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，分別配制羥鈷胺對照溶液、甲鈷胺對照溶液和維生素B12對照溶液；

S5配制輔料溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，配制輔料溶液；

S6配制靈敏度溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，配制靈敏度溶液；

S7配制系統適用性溶液：在避光環境下，光強度≤5lx條件下，配制系統適用性溶液；

S8色譜分析測定，取系統適用性溶液，空白溶液，輔料溶液，靈敏度溶液，對照品溶液，供試品溶液適量，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并根據液相色譜圖分析測定甲鈷胺片雜質含量。