[發(fā)明專利]巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611264732.7 | 申請日： | 2016-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN106718923A | 公開（公告）日： | 2017-05-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李翠;張占江;王一諾;韋瑩;郭曉云;韋坤華;李林軒 | 申請（專利權(quán)）人： | 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京遠大卓悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11369 | 代理人： | 靳浩 |
| 地址： | 530023 廣西*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 黃連 組織 高效 誘導(dǎo) 方法 | ||
1.一種巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，取巖黃連外植體經(jīng)洗凈消毒后接種至誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)培養(yǎng)10-15天得到愈傷組織，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以B5培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還加入6-芐基腺嘌呤0.5-1.5mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸0.5-1.5mg/L、維生素C 5-20mg/L、活性炭0.1-0.3g/L、蔗糖20-30g/L以及瓊脂3.8-4.5g/L，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為6.0。
2.如權(quán)利要求1所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，將所述愈傷組織接種至增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，所述增殖培養(yǎng)基是以B5培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還添加6-芐基腺嘌呤0.1-1.0mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸0.2-1.0mg/L、維生素C5-20mg/L、活性炭0.1-0.3g/L、蔗糖20-30g/L以及瓊脂3.8-4.5g/L，所述增殖培養(yǎng)基的pH值為5.8。
3.如權(quán)利要求1所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)的具體步驟為：將消毒后的所述巖黃連外植體放于溫度為23-26℃下，先暗培養(yǎng)1周后，再置于的光照時間為10-12h/d，光照強度1400-2000lux的條件下培養(yǎng)3-8天。
4.如權(quán)利要求2所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度25±2℃，光照強度1400-2000lux，光照強度為10-12h/d。
5.如權(quán)利要求1所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述巖黃連外植體洗凈消毒方法為：取巖黃連外植體依次用2％清洗劑水溶液浸泡5-10min、線狀自來水沖洗5-15min、質(zhì)量濃度為75％乙醇表面消毒30-45s、質(zhì)量濃度為0.1％HgCl2消毒8-10min、無菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙吸去表面水分，備用。
6.如權(quán)利要求1所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述巖黃連外植體為葉片、葉柄，莖中的一種。
7.如權(quán)利要求1所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基中還加入有水楊酸0.59-0.88mg/L、茉莉酸甲酯0.42-0.79mg/L、精氨酸0.4-1g/L、L-半胱氨酸0.2-0.8g/L以及賴氨酸0.1-0.6g/L。
8.如權(quán)利要求2所述的巖黃連愈傷組織高效誘導(dǎo)方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基中還加入油菜素內(nèi)酯0.04-0.08mg/L、硼氫化鉀7-12mg/L、硫酸亞鐵3-6mg/L以及葉酸0.4-0.8mg/L。
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