[發明專利]一種誘導肌腱組織再生的生物活性支架及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201611263819.2
• 申請日: 2016-12-28
• 公開（公告）號: CN108245708B
• 公開（公告）日: 2021-04-23
• 發明（設計）人: 秦廷武;寧良菊;張亞靖;崔靜;姚璇;羅靜聰
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/58
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明公開了一種制備誘導肌腱組織再生的生物活性支架的方法，包括如下步驟：(1)取新鮮肌腱，脫細胞處理，得脫細胞肌腱壓片或切片支架；(2)在支架上復合細胞外基質，即可。本發明還公開了前述方法制備的脫細胞肌腱生物活性支架及其用途。本發明方法制備的脫細胞肌腱支架生物活性高，體內修復效果良好，免疫原性低，生物相容性好，制備方法簡單，成本低廉，具有較好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種具有肌腱組織再生的生物活性支架的制備方法及其用途，屬于生物材料領域。

背景技術

由于疾病、創傷、退變等原因導致的肌腱損傷已成為不可忽視的健康問題。目前肌腱損傷修復的方法多種多樣，包括自體肌腱移植、同種或異種肌腱移植和人工材料替代等。自體肌腱移植會造成供區疼痛、感染、損傷，同時所能供給的肌腱來源有限；同種異體肌腱移植可能引起疾病的傳播，出現不同程度的排斥反應，也存在來源有限的問題；異種肌腱移植也可能引起疾病傳播，但最主要的問題是存在免疫排斥反應；人工肌腱由于力學相容性較差或降解速率難與組織再生同步等問題，使得肌腱缺損修復的長期效果有待觀察，且價格昂貴。理想的肌腱修復材料應具備以下條件：(1)良好的生物相容性；(2)良好的力學相容性；(3)具有誘導肌腱組織再生的潛能；(4)形狀大小可控，加工制備方法有可操作性。查閱大量文獻結果表明，目前使用的肌腱損傷修復材料均存在各自的缺陷和不足，因此尋求更加理想的肌腱修復材料的腳步從未停止。

隨著組織工程技術的發展，激勵著研究人員試圖通過組織工程肌腱來解決肌腱損傷修復困難這一難題。在國內外學者的共同努力探索下，組織工程肌腱的相關研究已取得巨大進展。然而，到目前為止，很多技術問題依然懸而未決：種子細胞的來源、數量以及質量等問題；缺乏理想的支架材料；外源性生長因子通過緩釋技術用于組織工程肌腱時其濃度如何控制，多因子的協同作用及有序作用如何解決；體外力學刺激的作用機制及最佳的應力刺激條件尚需研究。而且傳統的工程化肌腱的大規模應用，需要依賴于工程化肌腱的構建和長期保存及運輸，其生產制備過程耗時，保存費用昂貴。總之，現有的組織工程肌腱產品的生物功能不甚理想，難于保存和運輸，很難實現臨床推廣應用。因此，組織工程肌腱的發展遇到了技術瓶頸，利用傳統的組織工程方法構建的組織工程肌腱尚難以用于臨床實現肌腱缺損修復和再生的目標。

前期研究(Preparation and characterization of decellularized tendonslices for tendon tissue engineering.Journal of Biomedical Materials ResearchPart A，2012:100A:1448–1456)和發明專利(專利號：ZL201310636964.0)，已經證實脫細胞肌腱切片和壓片支架是較好的肌腱組織工程的支架材料。其優越性包括：(1)這些支架主要是由平行排列的I型膠原構成，具有天然肌腱的結構和組成成分；(2)具有肌腱特有的三維空間結構，有利于細胞粘附和增殖，能為細胞提供良好的生長環境并有利于細胞與支架及細胞與細胞間的信息傳遞；(3)加工處理過程中除去了細胞相關物質和異種抗原，抗原性顯著降低；(4)保留了肌腱的基本力學強度；(5)支架的加工和處理方法相對溫和，有利于保留材料中的生物活性物質；(6)動物的肌腱組織來源豐富，無需從人體組織取材，減少了創傷，避免了自體或異體肌腱組織來源受限的問題。盡管如此，上述肌腱切片或壓片支架經過一系列物理加工和酶學處理，生物活性物質部分丟失，在體外誘導干細胞腱向分化或者體內促進肌腱組織再生的能力受到限制。

因此，對上述肌腱切片或壓片支架進行生物修飾，以增強其生物活性非常必要。

目前對支架進行生物修飾以提高生物活性的方法通常是直接復合生物活性因子，但是該方法制備得到的復合支架中生物活性因子種類有限，每種因子的合適濃度難以確定，因此生物活性有限，效果不盡如人意。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供了一種新的生物活性支架及其制備方法和用途。

本發明制備誘導肌腱組織再生的生物活性支架的方法，包括如下步驟：