[發明專利]用于建立臨床營養菌種資源庫的益生菌篩選方法

在審

• 申請號: 201611263098.5
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN107043705A
• 公開（公告）日: 2017-08-15
• 發明（設計）人: 文姝;唐立;潘浩宇;李培培;袁杰力;劉銀輝;郭艷杰;李華軍;李明
• 申請（專利權）人: 大連醫科大學
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C12Q1/04;C12Q1/10;C12Q1/14;C12Q1/32;C12Q1/37;G01N33/50
• 代理公司: 大連非凡專利事務所21220
• 代理人: 閃紅霞

1.一種用于建立臨床營養菌種資源庫的益生菌篩選方法，其特征在于依次

按照如下步驟進行：

a. 分別采集代謝功能好、免疫力強及抗感染能力強的人群新鮮糞便為標本；

b. 用選擇性培養基篩選出各種益生菌菌株；

c. 通過試驗進一步篩選出具有促進抑菌、生物拮抗功能的優良益生菌菌株、具有促進代謝功能的優良益生菌菌株及促進免疫功能的優良益生菌菌株：

c.1 根據基本生物特性進行篩選

進行對酸性環境和膽汁的耐受能力、細菌的粘附能力試驗，將耐受能力好、粘附能力強的菌株作為初步篩選菌株進行下一步篩選；

c.2 定植抗力功能體外篩選

對初步篩選的菌株進行抑菌實驗，篩選能有效抑制病菌的益生菌菌株，所述病菌為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌和白色念珠菌；

c.3 促進代謝功能體外篩選

通過檢測初步篩選的菌株的胰蛋白酶、胃蛋白酶、胞外蛋白酶、肽酶、乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶等活性，篩選具有不同代謝功能的益生菌菌株；

c.4 促進免疫功能體外篩選

以PBMC作為體外免疫篩選的實驗細胞，檢測初步篩選的菌株對PBMC細胞因子分泌的影響，篩選免疫刺激功能強的益生菌菌株。

2.根據權利要求1所述的用于建立臨床營養菌種資源庫的益生菌篩選方法，其特征在于：所述a步驟采集標本后向樣本中添加益生菌培養基及羊血，4℃保存最多4天。