[發明專利]一種白僵蠶的人工制備方法

有效

• 申請號: 201611261928.0
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN106614423B
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 青學剛;李文學;陳寶瑞;肖金樹;劉剛;張友洪;周安蓮;肖文福;黃蓋群;劉俊鳳;尹紅;殷浩;王曉芬;陳義安;王皓
• 申請（專利權）人: 四川省農業科學院蠶業研究所;四川省南充市桃園生物化學研究開發有限公司
• 主分類號: A01K67/04
• 分類號: A01K67/04
• 代理公司: 成都市集智匯華知識產權代理事務所(普通合伙) 51237
• 代理人: 李華;溫黎娟

本發明公開一種白僵蠶的人工制備方法，包括(1)球孢白僵菌孢子液的制備：用無菌水浸泡、清洗白僵蠶蠶體，過濾后取濾液，經過一級斜面培養、二級種子培養、三級擴大培養后得球孢白僵菌孢子液；(2)病原攻毒：球孢白僵菌孢子液在制成后的45min內，迅速噴施于5齡起蠶的蠶體，噴施完成后密閉蠶房1?1.5h；(3)蠶體培養：打開蠶房，對蠶體喂食，每隔3?4h喂食一次，直至蠶體死亡；(4)白僵蠶培養：將死亡后的蠶體轉移至蠶座上，在溫度為25?28℃，濕度為95?98％的條件下繼續培養至蠶體僵化，并長出白色菌絲分生孢子；(5)白僵蠶成品制備：將長出白色菌絲分生孢子的白僵蠶收集后干燥至水分小于10％，即得白僵蠶成品。其白僵蠶成品的制備周期短，產量和質量高。

技術領域

本發明涉及一種白僵蠶的人工制備方法。

背景技術

白僵蠶為蠶蛾科動物家蠶蛾的幼蟲感染白僵菌而僵死的全蟲。白僵蠶是一味藥用價值較高的中藥，其味咸、辛，性平，可治面上黑及礙容性疾病，白僵蠶含有氨基酸和活性絲光素，有營養皮膚和美容作用；含蛋白質有刺激上皮脂腺，調節性激素分泌的作用；含維生素E，能清除自由基，抗脂質氧化形成的老年斑；含活性絲光素能促使皮膚細胞新生，調節皮脂，改善皮膚微循環，可增白防曬。

過去白僵蠶均為自然死亡，后來進行人工接種培養，在蠶4次蛻皮，接種后，蠶陸續發病死亡，及時揀出，另行攤放，保持同樣溫度，待其充分發僵變白后，置于通風處，風干或弱光下曬干。然而現有的人工生產的白僵蠶，仍然存在一些問題，如感染后的蠶體從死亡到僵化時間較長，白僵蠶的僵化率較低，僵化時間不整齊，質量不穩定，產量較低，成本也較高，不能達到產業化生產。

發明內容

有鑒于此，本申請提供一種白僵蠶的人工制備方法，其采用的球孢白僵菌孢子液經過復壯，提高了攻毒活性，僵化率高，通過攻毒、蠶體培養、白僵蠶培養過程中溫度、濕度等條件的改進，縮短了白僵蠶成品的制備周期，提高了白僵蠶的產量和質量。

為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是一種白僵蠶的人工制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

(1)球孢白僵菌孢子液的制備：用無菌水浸泡、清洗白僵蠶蠶體，過濾后取濾液，經過一級斜面培養、二級種子培養、三級擴大培養后得球孢白僵菌孢子液；

(2)病原攻毒：步驟(1)所述球孢白僵菌孢子液在制成后的45min內，迅速噴施于5齡起蠶的蠶體，噴施完成后密閉蠶房1-1.5h；

(3)蠶體培養：打開步驟(2)所述蠶房，對蠶體喂食，每隔3-4h喂食一次，直至蠶體死亡；

(4)白僵蠶培養：將步驟(3)死亡后的蠶體轉移至蠶座上，在溫度為25-28℃，濕度為95-98％的條件下繼續培養至蠶體僵化，并長出白色菌絲分生孢子；

(5)白僵蠶成品制備：將步驟(4)長出白色菌絲分生孢子的白僵蠶收集后干燥至水分小于10％，即得白僵蠶成品。

優選的，步驟(1)所述一級斜面培養的溫度為25-28℃，所述二級種子培養和三級擴大培養的溫度為5-10℃。

優選的，步驟(1)所述二級種子培養和三級擴大培養的培養基，其組分按重量百分比計包括：PDA培養基，補充10-20％馬鈴薯淀粉、5-20％蔗糖、10-15％蛋白胨、0.1-0.5％磷酸二氫鉀、0.01-0.05％硫酸鎂、5-15％蠶蛹粉、0.01-0.05％維生素B、0.01-0.05％維生素C、0.05-0.1％氯化鐵、0.05-0.1％氯化鈣。

更為優選的，步驟(1)所述二級種子培養和三級擴大培養的培養基，其組分按重量百分比計包括：補充18％馬鈴薯淀粉、15％蔗糖、12％蛋白胨、0.3％磷酸二氫鉀、0.02％硫酸鎂、12％蠶蛹粉、0.03％維生素B、0.02％維生素C、0.08％氯化鐵、0.06％氯化鈣。

優選的，步驟(2)所述病原攻毒的溫度為22-24℃，濕度為98％以上。