[發(fā)明專利]一種G5-MoS2

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611254767.2
• 申請日: 2016-12-30
• 公開（公告）號: CN106620701B
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 史向陽;孔令丹;孫文杰
• 申請（專利權(quán)）人: 東華大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K41/00;A61K47/60;A61P35/00
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;魏峯

本發(fā)明涉及一種G5?MoS₂/Bcl?2siRNA復合物的制備方法，包括：將LA經(jīng)過EDC·HCl和NHS活化，得到活化的LA；然后將活化的LA滴加到G5.NH₂的溶液中，反應24h，透析，冷凍干燥，得到G5?LA；將G5?LA加入到MoS₂溶液中，超聲振蕩，攪拌12h，離心，洗滌，得到G5?MoS₂納米花；將G5?MoS₂納米花與Bcl?2 siRNA孵育20～30min，得到G5?MoS₂/Bcl?2 siRNA復合物。本發(fā)明的方法具有工藝簡單，易操作，光熱轉(zhuǎn)換效率高，轉(zhuǎn)染條件簡單，轉(zhuǎn)染效率高等優(yōu)點，在光熱和基因雙重治療中有良好的應用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于光熱和基因雙重治療中納米材料的制備領(lǐng)域，特別涉及一種G5-MoS₂/Bcl-2 siRNA復合物的制備方法。

背景技術(shù)

癌癥治療方法的探索，是一個不斷發(fā)展又不斷遇到挑戰(zhàn)的過程。傳統(tǒng)的治療方法比如外科手術(shù)，化學治療和放射治療存在著很多缺點，這些缺點體現(xiàn)在以下幾個方面：第一，腫瘤部位不能完全被切除，可能導致腫瘤的再生和轉(zhuǎn)移；第二，長期的化療可能導致腫瘤的多重耐藥性；第三，對正常的細胞也存在損傷，進而引發(fā)惡心，脫發(fā)和乏力等副作用。因此，開發(fā)一種新型的腫瘤治療體系顯得至關(guān)重要。這種體系需要對生物體友好，同時具有高效的腫瘤治療效率和較低的副作用。近些年，光熱治療作為一種新型的，副作用少的，短期的治療方法，吸引了很多研究者的關(guān)注。光熱治療是利用具有較高光熱轉(zhuǎn)換效率的材料，在外部光源(一般是近紅外光)的照射下殺死癌細胞的一種治療方法。在這種情況下，光熱治療劑能吸收光能并將光能轉(zhuǎn)化為熱能來產(chǎn)生較高的溫度，從而導致癌細胞的死亡。

隨著光熱治療方法的興起，迄今已經(jīng)發(fā)展了四代材料體系：第一種，具有高光熱轉(zhuǎn)換效率的貴金屬納米材料，比如金(Au)、銀(Ag)、鈀(Pd)等，但其價格昂貴限制其廣泛運用；第二種，具有較大光熱轉(zhuǎn)換面積的碳類材料，包括石墨烯和碳納米棒等，但是其親水性和近紅外吸收能力較差；第三種，有機染料，比如吲哚菁綠、普魯士藍等，雖然擁有較高的光熱轉(zhuǎn)換效率但容易被分解；第四種，金屬和非金屬化合物，例如硫化銅(CuS)和硫化鋅(ZnS)，雖在光熱治療上具有較好的應用前景，但是卻也存在著對組織和細胞潛在的慢性毒性。二硫化鉬(MoS₂)作為一種過渡金屬二硫化物無機材料，具有獨特的結(jié)構(gòu)特點和近紅外吸收能力，其良好的生物相容性和強的光熱轉(zhuǎn)換效率使其成為一種安全高效的新型光熱劑。然而僅僅通過光熱治療并不能夠保證將癌細胞完全的殺死，因此考慮通過協(xié)同治療來實現(xiàn)癌癥的治療。

由小干擾RNA(siRNA)介導的基因治療作為另一種有前景的治療方法，已成為一種熱點研究課題。siRNA通過在細胞內(nèi)誘導特異性的基因沉默從而殺死癌細胞。然而，siRNA容易被細胞內(nèi)的酶降解，而且由于其與細胞表面類似的電荷使其不易被細胞內(nèi)吞。因此，擺在研究者面前的難題依舊是研發(fā)一種安全而高效的基因傳遞載體用于siRNA的傳遞。在前期的工作中，樹狀大分子包裹的金納米顆粒和功能化的樹狀大分子包裹的金納米顆粒都被證明是一種安全高效的基因傳遞載體。因此，將光熱治療和基因治療結(jié)合在一起是一種合理的，并可執(zhí)行的雙重治療方法。

檢索國內(nèi)外相關(guān)文獻和專利結(jié)果表明：以第五代聚酰胺胺樹狀大分子修飾的二硫化鉬作為載體，實現(xiàn)光熱和基因雙重治療的方法，尚未見報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種G5-MoS₂(第五代聚酰胺胺樹狀大分子修飾的二硫化鉬)/Bcl-2 siRNA復合物的制備方法，該方法具有工藝簡單，易操作，光熱轉(zhuǎn)換效率高，轉(zhuǎn)染條件簡單，轉(zhuǎn)染效率高等優(yōu)點，在腫瘤的光熱和基因雙重治療中有良好的應用前景；制備的第五代聚酰胺胺樹狀大分子修飾的二硫化鉬能實現(xiàn)癌細胞的光熱治療同時負載的Bcl-2 siRNA能誘導特異性癌細胞基因沉默。