[發明專利]一種抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201611221881.5
• 申請日: 2016-12-27
• 公開（公告）號: CN106860484B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 錢正明;肖瑛;甄達明;李春紅;蔡宏偉;溫寶慶;陳榮升;唐新發
• 申請（專利權）人: 東莞市東陽光冬蟲夏草研發有限公司;宜昌山城水都冬蟲夏草有限公司
• 主分類號: A61K36/068
• 分類號: A61K36/068;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物，其特征在于，鮮冬蟲夏草提取物中多糖含量為69.4～76.7％，蛋白含量為10.2～14.3％；所述多糖包含3種分子量大于1KDa的多糖，重均分子量分別為1422KDa，29KDa和2.7KDa；所述蛋白的分子量分布范圍主要存在于10～15KDa和20～37KDa處；所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法包括以下步驟：

a、將鮮冬蟲夏草破碎，加水勻漿，粉碎，控制溫度為15～25℃；

b、將勻漿后的鮮冬蟲夏草進行超聲提取，控制溫度為15～25℃，離心得上清液，然后將鮮冬蟲夏草殘渣于-20℃冷凍靜置；

c、將冷凍的鮮冬蟲夏草殘渣取出，加水勻漿并分散均勻，再次超聲提取，控制溫度為15～25℃，然后離心，得上清液，合并步驟b的上清液；

d、往離心后的上清液中加無水乙醇至濃度為60～80％后，在4℃下靜置過夜；于4℃下冷凍離心，收集沉淀；

e、將沉淀進行冷凍干燥，得鮮冬蟲夏草提取物。

2.一種權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

a、將鮮冬蟲夏草破碎，加水勻漿，粉碎，控制溫度為15～25℃；

b、將勻漿后的鮮冬蟲夏草進行超聲提取，控制溫度為15～25℃，離心得上清液，然后將鮮冬蟲夏草殘渣于-20℃冷凍靜置；

c、將冷凍的鮮冬蟲夏草殘渣取出，加水勻漿并分散均勻，再次超聲提取，控制溫度為15～25℃，然后離心，得上清液，合并步驟b的上清液；

d、往離心后的上清液中加無水乙醇至濃度為60～80％后，在4℃下靜置過夜；于4℃下冷凍離心，收集沉淀；

e、將沉淀進行冷凍干燥，得鮮冬蟲夏草提取物。

3.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，其中，在步驟a中，所述的鮮冬蟲夏草和水的重量體積比為1:8～12g/mL，勻漿時間為4～8min，勻漿轉速為14000～18000rpm。

4.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，其中，在步驟b中，超聲提取時間為20～40min，超聲功率為400～600W，離心時間為10～15min，離心轉速為8000～10000rpm，冷凍靜置時間為20～60min。

5.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，其中，在步驟c中，所述的鮮冬蟲夏草殘渣和水的重量體積比為1:8～12g/mL，再次勻漿時間為4～8min，勻漿轉速為14000～18000rpm，再次超聲提取時間為20～40min，超聲功率為400～600W，離心時間為10～15min，離心轉速為8000～10000rpm。

6.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，其中，在步驟d中，冷凍離心的時間為15～25min，離心的轉速為8000～10000rpm。

7.根據權利要求2所述的具有抗腫瘤活性的鮮冬蟲夏草提取物的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

a、將鮮冬蟲夏草破碎，按鮮冬蟲夏草與水的重量體積比加入1:10g/mL的水，勻漿6min，勻漿轉速為16000rpm，粉碎，控制溫度為20±2℃，將鮮冬蟲夏草粉碎成細小顆粒的混懸液；

b、將勻漿后的鮮冬蟲夏草進行超聲提取30min，控制溫度為20±2℃，功率為400～600W，離心12min，轉速為9000rmp，得上清液，然后將鮮冬蟲夏草殘渣于-20℃冷凍靜置40min；

c、將冷凍的鮮冬蟲夏草殘渣取出，加入重量體積比為1:10g/mL的水，勻漿6min，勻漿轉速為16000rpm，并分散均勻，再次超聲提取30min，控制溫度為20±2℃，功率為400～600W，然后離心12min，離心的轉速為9000rpm，得上清液，合并步驟b的上清液；

d、往離心后的上清液中加無水乙醇至濃度為60～80％后，在4℃下靜置過夜；于4℃下冷凍離心20min，離心轉速為10000rpm，收集沉淀；

e、將沉淀進行冷凍干燥，得鮮冬蟲夏草提取物。