[發明專利]一種姬玉露的離體快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201611209940.7
• 申請日: 2016-12-24
• 公開（公告）號: CN106577294B
• 公開（公告）日: 2018-08-24
• 發明（設計）人: 董誠明;蘇秀紅;王琳琳;魏碩;熊玉平
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 蔡文雅

本發明涉及姬玉露的離體快速繁殖方法，可有效解決姬玉露常規繁殖方法周期較長，受自然環境影響較大，很難滿足市場上對姬玉露的需求問題，其解決的技術方案是，包括以下步驟：1）外植體表面滅菌；2）愈傷組織的誘導；3）芽的誘導；4）芽增殖；5）生根；6）馴化移栽。本發明方法簡單易行，可以在短時間內大大提高其繁殖效率，為姬玉露工廠化生產提供前期的技術支持，不受自然界環境影響的特點，可以用于姬玉露大規模的快速繁育，同時也為其他多肉植物的研究提供一定的參考，是姬玉露繁殖方法上的創新。

技術領域

本發明涉及一種生物技術中植物組織培養的方法，特別是一種姬玉露的離體快速繁殖方法。

背景技術

姬玉露(Haworthia cooperi v.truncata)花如其名，小巧、通透、色澤淡雅，是百合科十二卷屬中很可愛的多肉植物，在家中、辦公室等場所用作小盆栽點綴，不僅賞心悅目，而且可凈化空氣。近幾十年來，因其本身極強的觀賞性、頑強的生命力，以及互聯網的發達等客觀條件，姬玉露已經成為人們爭相收藏與養護的多肉植物，被人們形象的稱為“有窗植物”。但是由于姬玉露本身生長極其緩慢，環境條件要求嚴格，因此養護成本高，植株價格昂貴，并且目前多肉植物的研究也相對滯后。目前姬玉露的繁殖主要依靠分株繁殖，種子繁殖雖然也是其常用的的繁殖方法之一，但是要通過人工授粉，方能獲取種子。且這些常規繁殖方法周期較長，受自然環境影響較大。很難滿足市場上對姬玉露的需求。為克服以上存在的問題，采用組織培養技術加快姬玉露的繁殖與生長，降低成本，那么姬玉露的觀賞價值會得到充分的展現，人們也可以感受到它帶來的喜悅心情與健康環保，目前尚未見有關姬玉露的離體快繁方法的報道。

發明內容

針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種姬玉露的離體快速繁殖方法，可有效解決姬玉露常規繁殖方法周期較長，受自然環境影響較大，很難滿足市場上對姬玉露的需求問題。

本發明解決的技術方案是，包括以下步驟：

1)外植體表面滅菌：以姬玉露的葉片為外植體，將0.05-0.1g肥皂，溶解到150-200ml的自來水中制作成肥皂水，然后把姬玉露的葉片在肥皂水中浸泡15min，至流水下沖洗2h，將沖洗干凈的姬玉露葉片在無菌操作臺上，用體積濃度為75％的酒精表面消毒30s，再用質量濃度為0.1％的HgCL₂(氯化汞)表面消毒7min，最后用無菌水沖洗5-7次；

2)愈傷組織的誘導：將經過表面滅菌的葉片外植體在無菌操作臺上切成0.3cm²-0.6cm²的小塊，放入經過高壓滅菌的培養基中，每瓶培養基為50ml，每瓶放入5塊外植體，在培養室內溫度23-27℃、光照強度1500～2000lx、光照時間12h/d下進行培養，培養30d后統計愈傷組織的誘導率；所述的培養基是由：每1000ml的1/2MS(MS培養基中的大量元素減半，鐵鹽、微量元素、維生素不減，MS培養基的具體配方用量見附表)培養基中加入6-BA(6-芐氨基腺嘌呤)1-3mg和NAA(萘乙酸)0.2-2mg制成；

3)芽的誘導：將誘導出的愈傷組織，轉入每1000ml的MS培養基中加入6-BA 0.3-3mg和NAA 0.1-1mg制成的培養基中誘導分化，每瓶培養基裝量為50ml，每瓶放入5塊愈傷組織，培養室內溫度23-27℃、光照強度1500～2000lx、光照時間12h/d下進行芽的誘導；30d后統計不定芽的誘導率；

4)芽增殖：將具不定芽的愈傷組織切割成若干塊，每塊具2-3個不定芽，轉入每1000ml的MS培養基中加入6-BA 0.5-1mg和NAA 0.05-0.2mg制成的增殖培養基中，每瓶增殖培養基裝量為50ml，每瓶放入5塊，培養室內溫度23-27℃、光照強度1500～2000lx、光照時間12h/d下進行培養，30d后統計不定芽的增殖倍數；