[發(fā)明專利]一種用于低溫狀態(tài)下腐熟的秸稈腐熟劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611204518.2
• 申請(qǐng)日: 2013-12-03
• 公開（公告）號(hào): CN106701621B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜秉海;林金新;董少英;姚良同;丁延芹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州農(nóng)博士生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/16;C12N1/14;C05G1/00;C05F15/00;C05F11/08;C12R1/06;C12R1/125;C12R1/865;C12R1/685;C12R1/885
• 代理公司: 福州市博深專利事務(wù)所(普通合伙) 35214
• 代理人: 林志崢

1.一種用于低溫狀態(tài)下腐熟的秸稈腐熟劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：將菌株節(jié)桿菌(Arthrobacter arilaiti)YO-H、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、黑曲霉(Aspergillus niger)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)分別培養(yǎng)，培養(yǎng)至菌濃度為10⁸/mL，按體積比1：1：1：2：2混合均勻得混合菌液，所得混合菌液以1:10的比例接種到水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50％的麥麩中培養(yǎng)10天，置陰涼處風(fēng)干至麥麩中水分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)小等于25％，加入麥麩質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％-1.5％的纖維素酶，混拌均勻即得到秸稈腐熟劑，所述菌株YO-H保藏號(hào)為CGMCC NO.4119；

所述菌株YO-H的培養(yǎng)方法如下：

1)菌種活化：從斜面保藏管中取1環(huán)菌株YO-H的菌苔至30mL液體培養(yǎng)基中，37℃、200—250rpm培養(yǎng)20-24小時(shí)；所述液體培養(yǎng)基制備方法如下：豆芽加去離子水煮沸20分鐘，所述豆芽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25％，過濾除渣，補(bǔ)足體積，加入5％質(zhì)量分?jǐn)?shù)的葡萄糖溶解混勻，調(diào)整pH值至7.0，121℃滅菌30分鐘；

2)搖瓶培養(yǎng)：用無(wú)菌移液器吸取步驟1)得到的菌液于搖瓶中，接種量：1％；溫度：37℃；轉(zhuǎn)速：200—250rpm；培養(yǎng)時(shí)間：20-24h；

3)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將步驟2)培養(yǎng)好的搖瓶接種到發(fā)酵罐擴(kuò)大培養(yǎng)，接種方式：火焰接種；接種量：1％；溫度：37℃；轉(zhuǎn)速：180—200rpm；通氣量為1:0.8；罐壓：0.02MPa；時(shí)間：24—36h；得菌株YO-H菌液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于低溫狀態(tài)下腐熟的秸稈腐熟劑的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中的搖瓶用液體培養(yǎng)基制備方法如下：豆芽加去離子水煮沸20分鐘，所述豆芽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25％，過濾除渣，補(bǔ)足體積，加入5％質(zhì)量分?jǐn)?shù)的葡萄糖溶解混勻，調(diào)整pH值至7.0，121℃滅菌30分鐘。