[發(fā)明專利]一個具ABC1-like kinase結構域的基因TaABC1-2及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611186721.1
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106834248B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設計）人: 曹愛忠;邢莉萍;楊文武;周傳玉;徐杰飛;胡平;劉佳倩;張瑞奇;張守忠;陳佩度
• 申請（專利權）人: 南京農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

本發(fā)明屬于基因工程領域，公開了一個具ABC1?like kinase結構域的基因TaABC1?2及其應用。具ABC1?like kinase結構域基因TaABC1?2的cDNA序列為SEQ ID NO.1及其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO.2。該基因來自普通小麥(Triticum asetivum L.)揚麥158。TaABC1?2在感白粉病小麥品種揚麥158中受白銹菌誘導表達增強，且表達水平遠高于在抗病小麥品種南農(nóng)9918中的表達水平。將TaABC1?2正向序列插入到pWMB006的BamHI和KpnI酶切位點間、同時反向序列插入到pWMB006的SpeI和SacI之間獲得干擾表達載體，并轉化感白粉病小麥品種揚麥158，陽性轉化植株的抗白粉病鑒定結果表明TaABC1?2的降低表達可以提高感白粉病小麥品種對白粉病的抗性。

技術領域

本發(fā)明屬于基因工程領域，公開了一個具ABC1-like kinase結構域的基因TaABC1-2及其應用。

背景技術

小麥是我國乃至世界最重要的糧食作物之一，其生長發(fā)育卻受多種非生物和生物脅迫。由小麥白粉菌(Blumeria graminis f.sp tritici)引起的小麥白粉病是小麥主要的病害之一。它屬于專化寄生，可以在整個生育期侵染小麥的葉部、莖稈、穗部等，其中主要危害小麥葉片，嚴重時影響小麥正常的光合作用，從而影響其正常的生長，降低產(chǎn)量。一般情況下，小麥白粉病能夠引起小麥減產(chǎn)5-19％，嚴重情況下能夠使小麥減產(chǎn)30％以上。從九十年代以后，全國每年小麥白粉病的發(fā)病面積在600萬公頃以上，嚴重危害小麥生產(chǎn)安全，因此小麥白粉病的防治越來越受到人們的關注。

選育抗白粉病小麥品種是最有效的方法。小麥和白粉菌在長期的進化過程中形成了復雜的互作系統(tǒng)，一方面小麥進化出了一系列抗病基因和復雜的抗病機制去抵抗白粉菌的侵染達到抗病目的，所以在小麥中導入抗病基因可以提高小麥對白粉病的抗性；另一方面白粉菌也進化出了一系列致病效應因子和復雜的致病機制去侵染植物達到致病目的，病原菌致病性的發(fā)揮不僅需要病原菌自身致病效應因子的參與，還需要激活或利用小麥的感病基因去達到成功侵染的目的，所以在小麥中降低感病基因的表達可以干擾白粉菌的侵染，同樣可以達到提高小麥對白粉病抗性的目的，但是目前可供基因工程利用的小麥感白粉病基因缺乏。

南農(nóng)9918是一個廣譜抗白粉病的小麥品種，與其遺傳背景類似的親本揚麥158是一個感白粉病小麥品種。利用轉錄譜技術獲得抗病南農(nóng)9918和感病揚麥158受白粉菌誘導前后的基因轉錄譜，通過比較兩個材料之間轉錄譜的差異，獲得了一個在感病揚麥158中受白粉菌誘導表達的基因TaABC1-2，該基因可能在白粉菌侵染過程中起到協(xié)助病原菌入侵和發(fā)育的作用，從而導致?lián)P麥158感病。所以在感病材料中降低TaABC1-2的表達，可以干擾病原菌的生產(chǎn)，起到提高感病材料抗白粉病的能力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的上述缺陷，提供一種具ABC1-like kinase結構域的基因TaABC1-2的重組干擾載體和應用。

本發(fā)明的目的可通過如下技術方案實現(xiàn)：

具ABC1-like kinase結構域的基因TaABC1-2來自普通小麥(Triticum asetivumL.)揚麥158，其核苷酸序列為SEQ ID NO.1。

該具ABC1-like kinase結構域的基因的蛋白質(zhì)為TaABC1-2，其氨基酸序列為SEQID NO.2。

含有所述的具ABC1-like kinase結構域的基因TaABC1-2的重組干擾載體。

所述的重組干擾載體pWMB006:TaABC RNAi優(yōu)選以pWMB006為出發(fā)載體，將TaABC1-2基因的正向序列插入到pWMB006的BamHI和KpnI酶切位點間、同時反向序列插入到pWMB006的SpeI和SacI之間所得。