[發(fā)明專利]一種微生物海藻肥的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201611185408.6
• 申請日: 2016-12-20
• 公開（公告）號: CN106588145A
• 公開（公告）日: 2017-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李淑英;徐牧;王熙濤
• 申請（專利權(quán)）人: 大連賽姆生物工程技術(shù)有限公司
• 主分類號: C05F11/08
• 分類號: C05F11/08;C05G3/04
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙)21235
• 代理人: 胡景波

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及肥料技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，涉及一種微生物海藻肥的制備方法。

背景技術(shù)

化肥的長期大量使用已經(jīng)逐漸造成土壤貧瘠、板結(jié)，營養(yǎng)失衡等問題的出現(xiàn)，而農(nóng)藥的長期濫用也導致了致病菌抗藥性增強，污染環(huán)境等嚴重問題。為保證農(nóng)業(yè)的高速可持續(xù)綠色發(fā)展，目前，我國農(nóng)業(yè)部已經(jīng)越來越重視有機肥料的使用，并提出逐步減少化肥及農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)中的使用量。海藻富含多種營養(yǎng)成分，是制造天然有機肥的上佳原料，其經(jīng)發(fā)酵降級的小分子寡糖類內(nèi)溶物中含有天然的植物生長調(diào)節(jié)劑，具有很高的生理活性，促進光合作用，調(diào)節(jié)內(nèi)源激素的平衡。海藻肥含有的糖醛酸苷類物質(zhì)，能改良土壤性狀，提高土壤保水能力，改善土壤團粒結(jié)構(gòu)，刺激植物根系及有益微生物的生長。然而，目前利用微生物充分發(fā)酵海藻以有效釋放其營養(yǎng)物質(zhì)還存在困難，因為海藻中含有大量難以被分解的多糖類物質(zhì)及高濃度的鹽?，F(xiàn)階段，發(fā)酵法制備海藻肥還存在很多缺陷，一是缺乏高效降解海藻多糖且可以直接用作菌肥的有效菌種；二是發(fā)酵菌種單一，缺乏多菌種間的協(xié)同作用，難以有效降解海藻內(nèi)大分子物質(zhì)，影響海藻肥的應用效果；三是為保證發(fā)酵效果，缺乏對海藻原料的有效預處理技術(shù)，傳統(tǒng)的酸堿法處理海藻，會破壞海藻中營養(yǎng)元素，并對環(huán)境造成污染。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)中傳統(tǒng)化學肥料和普通發(fā)酵法制備海藻肥料的不足，利用篩選到的兩株可產(chǎn)多種有益代謝產(chǎn)物的芽孢桿菌發(fā)酵制備復合微生物海藻肥料，經(jīng)過微切助技術(shù)處理之后，海藻原料中的營養(yǎng)成分可被充分釋放更易于微生物的利用和降解，極大提高了海藻肥料的品質(zhì)。而肥料中含有的有益微生物地衣芽孢桿菌WS-2廣泛的抑菌活性又可以一定程度上防治農(nóng)作物的多種病害問題，減少農(nóng)藥的使用，起到“藥肥合一”的復合功效。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)勢和積極效果為：本發(fā)明從海泥中篩選得到可以高效降解海藻多糖的地衣芽孢桿菌WS-2，此菌株含有豐富的糖苷酶活性和蛋白酶活性，能有效對海藻進行發(fā)酵，產(chǎn)生高濃度有利于植物生長的小分子褐藻寡糖類物質(zhì)。微切助技術(shù)處理過的海藻超微粉提升了營養(yǎng)物質(zhì)的釋放，再經(jīng)復合菌株發(fā)酵后，極大增強了海藻肥料的肥效。此外，地衣芽孢桿菌WS-2具有廣泛的抑菌譜，可一定程度上防治多種植物病害，減少農(nóng)藥的使用，起到“藥肥合一”的復合功效。

本發(fā)明可提高土壤肥力，有利于土壤形成團粒結(jié)構(gòu)從而改良土壤性狀，促進植物種子萌發(fā)及生長，增強植物抗逆能力，安全環(huán)保，改善產(chǎn)品品質(zhì)，使產(chǎn)品達到綠色或有機標準。

本發(fā)明提供的微生物海藻肥液體肥料可直接作用于植物，含有活性地衣芽孢桿菌WS-2的海藻菌肥可用于土壤基肥或生產(chǎn)復合肥。

保藏說明

本發(fā)明涉及的地衣芽孢桿菌WS-2，已于7月22日于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏(簡稱CGMCC；地址：中國科學院微生物研究所；郵編100101)，保藏編號為CGMCC No.12813。

具體實施方式

本發(fā)明技術(shù)方案如下：

一株地衣芽孢桿菌WS-2，菌種保藏編號為：CGMCC No.12813，革蘭氏染色陽性，桿狀，菌落表面粗糙，有隆起，邊緣不規(guī)則，可降解海藻多糖，在褐藻膠選擇性培養(yǎng)基上菌落形態(tài)為白色，圓形，邊緣整齊，最適生長pH為7.0～7.5，最適生長溫度25～35℃，分泌多種糖苷酶和蛋白酶，具有廣泛的抑菌活性。

取地衣芽孢桿菌WS-2，活化后，接種于海藻培養(yǎng)基中，半固體發(fā)酵培養(yǎng)得到發(fā)酵液。發(fā)酵液于4℃，1000g離心，收集上清液。上清液用0.22μm濾膜過濾，收集濾出液，得到海藻液體肥，富含褐藻寡糖。而離心后含有活性地衣芽孢桿菌WS-2的海藻肥固形物，低溫烘干，得海藻固體肥，用于復混肥的生產(chǎn)。

其中，所述地衣芽孢桿菌WS-2經(jīng)活化獲得?；罨N的培養(yǎng)基：過80目篩的海帶粉1％，蛋白胨0.5％，NaCl₂％、蔗糖0.25％、硫酸鎂0.02％、磷酸二氫鉀0.05％、氯化鈣0.01％，蒸餾水配置，經(jīng)121℃滅菌20分鐘。

而用于制備發(fā)酵液的所述海藻培養(yǎng)基主要成分是經(jīng)過微切助互作技術(shù)處理的海帶邊角料超微粉，由如下步驟獲得：

1)預處理海帶原料，干燥至含水量不高于10％，粗粉碎至40～60目；

2)加入質(zhì)量分數(shù)為1～2％的海藻酸鈉作為助劑，置于攪拌機中充分混勻；

3)利用高能振動磨產(chǎn)生的微剪切作用對2)中原料進行處理，處理時間為5～30分鐘，得到600～800目的微切超微海帶粉原料。