[發明專利]結合測定

在審

• 申請號: 201611180971.4
• 申請日: 2016-12-19
• 公開（公告）號: CN108204958A
• 公開（公告）日: 2018-06-26
• 發明（設計）人: 賈曉青;陳敏
• 申請（專利權）人: 伊繆泰普有限公司
• 主分類號: G01N21/45
• 分類號: G01N21/45;C07K14/705;G01N33/68
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 彭鯤鵬;鄭斌

結合測定。描述了用于測定包含淋巴細胞活化基因?3(LAG?3)蛋白或其片段、衍生物或類似物的制劑的MHC II類結合活性的方法。所述方法包括使用生物層干涉術(BLI)測定所述LAG?3蛋白、片段、衍生物或類似物與MHC II類分子的結合。所述方法可以用作所述化合物的良好生產規范(GMP)級生產中的質量控制測定。還描述了用于進行所述方法的探針和試劑盒。

技術領域

本發明涉及用于測定淋巴細胞活化基因-3(LAG-3)蛋白或其片段、衍生物或類似物制劑的MHC II類結合活性的方法，以及用于所述方法中的探針和試劑盒。

背景技術

LAG-3蛋白是具有四個細胞外免疫球蛋白超家族結構域的CD4I同源型膜蛋白。與CD4相似，LAG-3在T細胞的表面處低聚化，并且結合抗原遞呈細胞(APC)上的MHC II類分子，但具有比CD4顯著更高的親和力。LAG-3在活化的CD4⁺和CD8⁺T淋巴細胞上表達，其中它與細胞表面處的CD3/T細胞受體復合物締合并且負向調節信號轉導。因此，它負向調節T細胞增殖、功能和體內平衡。與效應或記憶T細胞相比，LAG-3在耗竭的T細胞上被上調。LAG-3也在腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)上被上調，并且使用抗LAG-3抗體阻斷LAG-3可以增強抗腫瘤T細胞應答。

IMP321是重組的、可溶性LAG-3Ig融合蛋白，其以高親合力結合MHC II類。它是靶向MHC II類陽性抗原遞呈細胞(APC)的第一類免疫增強劑(Fougeray等：A soluble LAG-3protein as an immunopotentiator for therapeutic vaccines：Preclinicalevaluation of IMP321.Vaccine 2006，24：5426-5433；Brignone等：IMP321(sLAG-3)safety and T cell response potentiation using an influenza vaccine as a modelantigen：A single-blind phase I study.Vaccine 2007，25：4641-4650；Brignone等：IMP321(sLAG-3)，an immunopotentiator for T cell responses against a HBsAgantigen in healthy adults：a single blind randomised controlled phase Istudy.J Immune Based Ther Vaccines 2007，5：5；Brignone等：A soluble form oflymphocyte activation gene-3(IMP321)induces activation of a large range ofhuman effector cytotoxic cells.J Immunol 2007，179：4202-4211)。IMP321已在先前治療的晚期腎細胞癌患者中測試，已知在通過3個月之內的重復注射所治療的所有患者中，IMP321是免疫抑制性的并且顯示出誘導循環活化的CD8 T細胞和長壽命的效應記憶CD8 T細胞的百分比增加，而沒有任何可檢測的毒性(Brignone等：A phase I pharmacokineticand biological correlative study of IMP321，a novel MHC class II agonist inpatients with advanced renal cell carcinoma.Clin Cancer Res 2009，15：6225-6231)。僅幾個ng/mL濃度的IMP321已顯示在體外對APC是具有活性的，這顯示了IMP321作為免疫系統的激動劑的巨大潛力(Brignone，等，2009，同上)。