[發明專利]衍生自腫瘤抗原PRAME的短肽

有效

• 申請號: 201611177319.7
• 申請日: 2016-12-19
• 公開（公告）號: CN108203460B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 李懿;余曉紅;龔海平;劉秋萍;陳琳;吳萬里
• 申請（專利權）人: 香雪生命科學技術（廣東）有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K14/74;C12N15/12;C12N5/0783;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;劉真真

本發明涉及衍生自PRAME的腫瘤抗原短肽，該短肽與MHC分子形成的復合物以及所述短肽與復合物的用途。同時，本發明還涉及與上述短肽或復合物結合的分子，以及這些分子的用途。

技術領域

本發明涉及新發現的衍生自腫瘤抗原PRAME的短肽，該短肽與MHC分子形成的復合物以及所述短肽與復合物的用途。同時，本發明還涉及與上述短肽或復合物結合的分子，以及這些分子的用途。

背景技術

眾所周知，在許多病理條件下，如感染、癌癥、自身免疫疾病等，都會有一些特定分子的不適宜表達。因此，這些分子就成了病理或異常狀態的“標記”。這些分子不但可以作為疾病診斷的標記物，還可用于產生診斷試劑和/或治療劑。例如，用癌癥的標記物來產生特定的抗體。另外，這些分子還可以有效地激發細胞毒性T淋巴細胞(CTL)的特異性免疫應答，發揮抗腫瘤效能，同時，還可以通過激活的CTL來獲得能夠與該“標記”結合的T細胞受體(TCR)作為治療劑。因此，這些分子，在相關疾病的診斷和治療中發揮著非常重要的作用。

對于腫瘤而言，已有很多文獻發表過不同的內源性的腫瘤抗原分子。但這并不是相關疾病真正的靶點，因為引起CTL免疫應答反應的并非完整的腫瘤抗原分子，而是來自于抗原的特異性CTL表位(Epitope)。一般情況下，腫瘤抗原在細胞內通過蛋白水解作用將其加工成為8-16個氨基酸長度的多肽片段，即CTL表位，進而與內質網腔中的主要組織相容性復合體(MHC，人類的MHC通常稱為HLA基因或HLA復合體)分子結合形成多肽-MHC復合物(peptide-MHC complex,pMHC),并最終將pMHC遞呈到細胞表面供CD8⁺T細胞表面的TCR識別。雖然相關的內源性腫瘤抗原分子早已有發表，但我們并不知曉被呈遞出的具體多肽片段。因此，無論是作為疫苗還是用于產生相關疾病的診斷試劑或是治療試劑，鑒定出這些被呈遞到細胞表面的8-16個氨基酸長度的多肽片段，即CTL表位，是至關重要的。本領域技術人員致力于發現并確定這些被呈遞到靶細胞表面的多肽片段。

這種被遞呈的多肽片段的發現與確定是一個復雜的過程，因為多肽被HLA遞呈是抗原蛋白的酶解以及多肽片段與HLA的相互作用的共同結果。這說明，完整的腫瘤抗原分子并不能為多肽片段的發現與鑒定提供任何信息。很多文獻發表了利用電腦模擬的方法，如公開數據庫SYFPEITHI(Rammensee,et al.,Immunogenetics.1999(50):213-219)和BIMAS(Parker,et al.,J.Immunol.1994.152:163)，提供預測算法來鑒定哪個多肽片段可能會被遞呈。但這只是一種預測，具有很大的不確定性，因為它并不是真正的胞內處理以及翻譯后的修飾過程。腫瘤組織經過處理后，可以利用質譜儀直接鑒定出腫瘤細胞表面被遞呈出的多肽片段，雖然這是一個復雜的過程，但這樣得到的結果是非常可靠的。同時，質譜儀的靈敏度也足以能夠鑒別低濃度的多肽片段以及翻譯后的修飾，因此它是發現及確定腫瘤表面多肽片段的理想工具。

PRAME為黑色素瘤特異性抗原(preferentially expressed antigen ofmelanoma，PRAME)，在88％初發和95％轉移黑色素瘤中都有表達(Ikeda H,etal.Immunity,1997,6(2):199-208),正常皮膚組織和良性黑素瘤細胞則不表達。除了黑色素瘤，PRAME還在多種腫瘤細胞中表達，包括肺鱗狀細胞癌、乳腺癌、腎細胞癌、頭頸部腫瘤、霍杰金氏淋巴瘤、肉瘤及成神經管細胞瘤等(van't Veer LJ,et al.Nature,2002,415(6871):530-536；Boon K,et al.Oncogene,2003,22(48):7687-7694)。因此，源自于PRAME抗原的肽，作為上述多種癌癥的靶點，不但可以作為上述疾病診斷的標記物，還可用于產生上述疾病的預防試劑和/或治療劑，如抗體或T細胞受體。本發明利用質譜儀分析并鑒定出了腫瘤細胞表面被呈遞的源自于腫瘤抗原PRAME的新的多肽片段。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種新發現的衍生自腫瘤抗原PRAME的短肽，該短肽與MHC分子形成的復合物以及所述短肽與復合物的用途。