[發(fā)明專利]一種解淀粉芽孢桿菌抑菌活性物質(zhì)提取方法及其作為菌劑在稻瘟病生防中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611151513.8
• 申請(qǐng)日: 2016-12-14
• 公開（公告）號(hào): CN108220180A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田雪亮;劉泉成;劉文德
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南科技學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/07
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供了一種解淀粉芽孢桿菌抑菌活性物質(zhì)提取方法及其作為菌劑在稻瘟病生防中的應(yīng)用。一種優(yōu)選的解淀粉芽孢桿菌保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC No.11488。本發(fā)明提供的應(yīng)用為利用所述的解淀粉芽孢桿菌產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)來防治稻瘟。所述解淀粉芽孢桿菌抑菌活性物質(zhì)提取流程能夠快速便捷的提取有效成分，并且具有較高的抑制稻瘟菌活性。所述的抑菌活性物質(zhì)開發(fā)為菌劑后，能夠用于防治稻瘟病，提供了一種高效穩(wěn)定的稻瘟病生防方法，能夠更好地滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治稻瘟病的要求。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種解淀粉芽孢桿菌抑菌活性物質(zhì)提取方法，尤其涉及一種含有解淀粉芽孢桿菌抑菌活性物質(zhì)的水劑在稻瘟病防治中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

稻瘟病是水稻重要病害，病原菌可以侵染水稻葉片、莖稈、穗部，分為苗瘟、葉瘟、節(jié)瘟、穗頸瘟、谷粒瘟。稻瘟病發(fā)生在水稻秧苗期和分蘗期，可造成水稻葉片大量枯死，水稻植株萎縮不抽穗或抽穗短小。稻瘟病在孕穗抽穗期發(fā)病，造成節(jié)瘟、穗頸瘟，可導(dǎo)致產(chǎn)生大量白穗或半白穗，產(chǎn)量損失極大。稻瘟病在我國(guó)南、北方稻區(qū)都有不同程度發(fā)生，流行年份一般減產(chǎn)10-20％，嚴(yán)重的減產(chǎn)達(dá)40-50％。

目前稻瘟病防治以化學(xué)防治為主，如甲基托布津可濕性粉劑、三環(huán)唑可濕性粉劑等。然而，由于稻瘟病菌的抗藥性以及化學(xué)防治對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重等問題，開展稻瘟病的生物防治研究具有重大意義。

目前，已經(jīng)篩選到一些對(duì)稻瘟病菌具有生防作用的微生物。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN105420156A公開了一株具有解磷防病促生作用的解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。該菌能有效防治白粉病、煙草黑脛病、灰霉病、稻瘟病、黃瓜枯萎病、番茄早疫病、甜椒炭疽病、西瓜菌核病、小麥赤霉病、西瓜枯萎病、辣椒疫霉病菌等，廣譜抗菌并且效果穩(wěn)定持久。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN104974965A公開了一株枯草芽孢桿菌JN005及其在防治水稻稻瘟病中的應(yīng)用。保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC No：M2015228。菌株JN005活體菌及其代謝產(chǎn)物對(duì)稻瘟病均有較好的防效，保護(hù)和治療作用兼具，可將其作為活體菌劑和代謝產(chǎn)物的劑型加工開發(fā)。

盡管已經(jīng)篩選到一些對(duì)稻瘟病菌具有生防作用的微生物，但還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。一方面，生防中拮抗微生物的多樣化使用有利于防止病菌產(chǎn)生抗性；另一方面，現(xiàn)有的能夠抑制稻瘟病菌的微生物的拮抗作用還不夠理想，不能夠更好地滿足農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中防治稻瘟病的要求。生防菌活體菌劑在生產(chǎn)、運(yùn)輸、保存和施用中存在局限性，由于菌體對(duì)環(huán)境條件要求較高，且對(duì)植物也有選擇性，在田間應(yīng)用時(shí)容易受到環(huán)境影響，從而降低防治效果。從生防菌中提取活性物質(zhì)，作為藥劑應(yīng)用到生產(chǎn)中，減少了菌體保存和在植物上定植的環(huán)節(jié)，提高了藥劑利用率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種解淀粉芽孢桿菌抑菌活性產(chǎn)物的提取方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述抑菌活性產(chǎn)物在稻瘟病生防中的應(yīng)用，以顯著提升稻瘟病防治效果。

本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種生防制劑，其制備工藝簡(jiǎn)單，且可以顯著提升稻瘟病生防效果。

根據(jù)本發(fā)明所述的解淀粉芽孢桿菌保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC No.11488。

根據(jù)本發(fā)明提供的所述應(yīng)用，解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液含有抑菌活性物質(zhì)，能夠有效抑制到稻瘟菌生長(zhǎng)。

根據(jù)本發(fā)明提供的所述應(yīng)用，將含有所述解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液經(jīng)HCL沉淀，甲醇抽提，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后所留沉淀為含有高濃度抑菌活性物質(zhì)，能夠有效抑制到稻瘟菌生長(zhǎng)。

根據(jù)本發(fā)明的所述應(yīng)用，所述解淀粉芽孢桿菌發(fā)酵液甲醇抽提后沉淀物與超純水配置成濃度為5％水劑。