[發明專利]一種以枇杷皮為原料的復合酵素及其制備方法

在審

• 申請號: 201611138509.8
• 申請日: 2016-12-12
• 公開（公告）號: CN106722947A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 向紅先
• 申請（專利權）人: 成都育芽科技有限公司
• 主分類號: A23L33/00
• 分類號: A23L33/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于酶發酵工程領域，具體涉及一種以枇杷皮為原料的復合酵素及其制備方法。

背景技術

枇杷是人們喜愛的水果之一，市場需求巨大，枇杷不僅果肉美味，而且其廢棄物枇杷皮也具有較好的抗氧化成分。然而，目前對于枇杷皮中抗氧化成本的提取多采取有機試劑提取的方法，如《枇杷皮和芒果皮粗提液抗氧化活性研究》和《枇杷皮色素提取物的體外抗氧化活性研究》。由有機試劑提取出來的成分常需要進行純化處理，難以大規模制備相應的抗氧化產品，更重要的是，有機試劑殘留對于人體健康具有著重大的威脅。

利用發酵菌對適宜發酵的原料進行發酵處理，具有可以大批量處理的優勢。然而，關于以枇杷皮作為原料進行發酵方面而言，目前的報道很少。在發明人所做的預實驗中，利用常規的發酵技術對枇杷皮進行發酵，發酵周期十分長，至少需要55天。更為重要的是，所得發酵產品的抗氧化性能僅為《枇杷皮和芒果皮粗提液抗氧化活性研究》報道中的30 %左右，說明常規的發酵技術對枇杷皮的利用率十分低。

因此，如何改進發酵技術，使得枇杷皮的利用率得以提高，并縮短發酵周期以節省制備成本，成為本領域亟待解決的問題。

另外，枇杷皮的抗氧化性能與其它水果（如香蕉、西瓜）相比較低，如何提高枇杷皮發酵物的抗氧化性能也是本領域的研究方向。

發明內容

針對現有技術的缺點，本發明的目的之一在于提供一種以枇杷皮為原料的復合酵素的制備方法，該制備方法包括如下步驟：

（1）按重量份計，準備如下原料：枇杷皮 10-12份，大蒜皮1-3份，砂糖0.5-1份；

（2）將枇杷皮和大蒜皮進行粉碎，過200目篩，加入20-25份水；

（3）向步驟（2）所得物接入活化了的Saccaromyces cerevisiae，接種量為3-5 %，進行發酵，發酵溫度為16-18℃，pH為3-4，發酵時間為12-15天；

（4）調整發酵溫度為20-22℃，pH為5-5.5，發酵時間為4-6天，取發酵液，即得所述復合酵素。

如本發明的一個對比實施例所示，當采取常規的發酵技術僅對枇杷皮進行發酵時，發酵周期長達55天以上，而且所得發酵產物的抗氧化性能很差，對卵黃脂蛋白不飽和脂肪酸過氧體系的抗氧化活性（AOA）不超過12 %。

本發明所述的發酵周期意為超過某一發酵時間后，再長的發酵時間不會增加發酵產物的產生。

而當采取本發明的兩級發酵技術后，發明人發現不僅發酵周期大幅縮短，而且所得產物的AOA很高，最高可達62.7 %。可能的原因在于，枇杷皮在發酵初期時，進程較慢，在中期時，受低溫控制的抑制物的產生較多，而將發酵溫度適當調高后，抑制物的生產較少，促進了發酵過程的平穩進行。其中的相關抑制物目前仍在分離鑒定當中。

蒜皮的加入可以將AOA從50%左右提升至60%左右。這與大蒜皮本身也具有一定的抗氧化性能有關。然而，值得指出的是，大蒜皮的加入，促進了發酵周期的進一步縮短，可縮短發酵時間約8天左右。由于大蒜皮對發酵時間縮短的貢獻不是主要的，可能的解釋在于大蒜皮的加入進一步抑制了上述抑制物的產生。這一點需要發明人后續將所述抑制物分離鑒定出來后，再行設置相關實驗予以驗證。

優選的，步驟（1）中，按重量份計，準備如下原料：枇杷皮 11份，大蒜皮2份，砂糖0.8份。

優選的，步驟（3）中，接種量為4 %。

優選的，步驟（3）中，發酵時間為13天。

優選的，步驟（4）中，發酵時間為4天。

本發明的另一目的在于提供由上述方法制備得到復合酵素。

本發明的有益效果：

本發明大幅度縮短了枇杷皮的發酵周期，并獲得了具有優秀的抗氧化性能的復合酵素；本發明中的大蒜皮對發酵周期的縮短有進一步的促進左右，且能所得酵素的抗氧化性能。

具體實施方式

下面通過實施例對本發明進行具體描述，有必要在此指出的是以下實施例只是用于對本發明進行進一步的說明，不能理解為對本發明保護范圍的限制，該領域的技術熟練人員根據上述發明內容所做出的一些非本質的改進和調整，仍屬于本發明的保護范圍。

實施例1

（1）按重量份計，準備如下原料：枇杷皮 10份，大蒜皮1份，砂糖0.5份；

（2）將枇杷皮和大蒜皮進行粉碎，過200目篩，加入20份水；

（3）向步驟（2）所得物接入活化了的Saccaromyces cerevisiae，接種量為3 %，進行發酵，發酵溫度為16-18℃，pH為3-4，發酵時間為12天；